肿瘤干细胞在肿瘤的发生发展中发挥着重要作用,因此其也是肿瘤治疗的重要靶点。实验室前期研究已经证实前B细胞白血病同源盒基因3(Pre-B-Cell Leukemia Homeobox 3,PBX3)在维持肝癌干细胞的特性方面发挥着重要作用。在进一步对肝癌细胞中PBX3研究过程中,我们发现PBX3是一种短半衰期蛋白,极不稳定。不稳定蛋白被认为容易通过泛素-蛋白酶体系统发生降解。然而当我们采用蛋白酶体抑制剂MG132处理肝癌细胞后,发现PBX3蛋白和m RNA水平都出现显著下调,提示PBX3蛋白降解不通过泛素-蛋白酶体途径。我们就想探讨MG132调节PBX3的机制。我们观察到肝癌细胞经MG132处理后,let-7c,mi R-200b,mi R-222和mi R-424的水平成上调趋势,与PBX3的变化呈负相关关系。在前期实验中,我们用mi RWalk作预测时发现PBX3是这些mi RNA作用的靶基因。因此,我们研究了蛋白酶体抑制剂MG132调节这些mi RNA的机制。有文献报道,Argonaute2蛋白是RNA诱导沉默复合体(RNA-induced silencing complex,RISC)的重要成分,它可以调节某些mi RNA的水平。因此,我们通过共转染、免疫共沉淀以及蛋白印迹法,研究了蛋白酶体抑制剂是否通过稳定Argonaute2来调节相关的mi RNA。我们发现MG132能通过抑制Argonaute2蛋白经泛素-蛋白酶体途径降解而稳定其表达。综上所述,与肝癌细胞干性密切相关的PBX3蛋白,不通过泛素-蛋白酶体系统发生降解,但蛋白酶体抑制剂MG132可通过稳定Argonaute2来上调mi RNA(let-7c,mi R-200b,mi R-222和mi R-424)从而抑制PBX3的表达。