研究背景和目的原发性肝细胞癌(hepatocellular carcinoma,HCC)是全球第六位发病和第三位死因的癌症,HCC在中国的发病率和死亡率位居世界前列。肝切除、消融以及肝移植主要对早期肝癌患者有效,绝大部分晚期HCC患者无法得到有效的治疗。尽管近些年来HCC的治疗取得了很大进展,但晚期HCC的治疗结果仍远不能令人满意,最佳治疗方案也很有限。此外,由于肝癌的频繁复发和转移,这一难治性疾病的预后仍然很差,这进一步强调迫切需要加深对肝癌发病机制的深入理解,并开发新的干预策略。2008年,SHARP实验显示接受索拉非尼治疗的晚期HCC患者的总体生存率(overall survival,OS)得到了显著改善。随后,索拉非尼被批准为第一个用于晚期HCC的系统治疗药物,但其提供的生存益处有限。索拉非尼作为多激酶抑制剂,其靶点包括c-Raf、b-Raf、VEGFR1/2/3、PDGFR-β、c-Kit、p38、Ret和FLT3等。筛选生物标志物来预测索拉非尼的疗效及其与患者预后关系的研究工作越来越多,然而迄今为止还没有生物标志物通过临床验证。此外,索拉非尼靶点在HCC中的表达及其与索拉非尼疗效间的关系仍不清楚。因此,有必要研究索拉非尼靶点在HCC中的表达与索拉非尼疗效之间的关系,并寻找新的生物标志物来选择患者提高索拉非尼疗效。基于癌基因突变或异常表达的分子分型已为肿瘤研究提供了新思路。在某些癌症中,特别是以EGFR或HER2为靶向治疗的肺癌和乳腺癌已取得实质性进展。然而,许多晚期HCC靶向治疗方案都在III期临床试验中以失败告终。成功的靶向治疗很大程度上依赖于基于某些生物标志物来选择特定的患者,但目前靶向治疗对于HCC的临床实践仍是一个持续的挑战。最近,Rimassa L等开展了MET抑制剂替凡替尼(tivantinib)用于治疗MET高表达HCC患者的III期临床试验,但其结果并不理想。然而,REACH-2试验表明,在AFP水平较高(≥400 ng/m L)的HCC人群中,使用ramucirumab治疗后,患者获得显著的临床益处。尽管这取得了成功,但这仅仅是第一项也是唯一一项通过生物标志物筛选患者来治疗HCC的阳性试验,除此之外没有可以用来筛选HCC病人进行针对性治疗的生物标志物。因此,确定有效的生物标志物来筛选HCC病人做到精准用药仍是HCC的重要研究内容之一。Fms样酪氨酸激酶3(Fms like tyrosine kinase 3,FLT3)由FLT3基因编码,属于受体型酪氨酸激酶家族(Receptor Tyrosine Kinase,RTK)。有报道证实,FLT3参与正常造血细胞的功能调节和造血系统恶性肿瘤的发生。作为一种酪氨酸激酶受体,索拉非尼可靶向FLT3。目前尚未见FLT3在HCC中的表达及其临床相关性。综上所述,在课题旨在:(1)分析在接受索拉非尼治疗的患者中,索拉非尼靶点表达情况与患者预后之间的关系;(2)研究FLT3可否作为预测HCC患者索拉非尼疗效的新指标。研究方法1.免疫组织化学染色检测索拉非尼靶点在97例术后接受索拉非尼辅助治疗HCC患者中的表达情况,并进行量化评分。2.单/多因素分析和Kaplan-Meier分析评估索拉非尼靶点在接受索拉非尼辅助治疗HCC患者中的表达及其与患者预后相关性。3.采用倾向匹配得分方法构建多中心复发性HCC队列cohort 1(n=276)来验证FLT3在预测索拉非尼获益方面的价值。4.用cutoff Finder确定cohort 1 FLT3高表达的最佳cutoff值。5.Kaplan-Meier分析影响cohort 1各亚组预后的因素。6.Real-time PCR和免疫组织化学染色检测原发性HCC患者中FLT3表达情况。7.用HCC和癌旁正常组织研究FLT3的表达和CNV。8.使用PDX模型确认FLT3水平与索拉非尼反应之间的关系。研究结果1.FLT3高表达与接受索拉非尼辅助治疗的患者的总体生存改善相关。2.在由复发患者组成的多中心队列中,接受索拉非尼辅助治疗患者的复发后生存率在FLT3高表达(cohort 1 42%)的亚组中显著提高。3.在相当一部分HCC患者中检测到拷贝数丢失和FLT3表达下降。4.FLT3高表达肿瘤来源的PDX对索拉非尼的反应更好。结论本研究发现,FLT3高表达的HCC病人能够索拉非尼获益,FLT3表达水平可用于指导HCC病人的分层治疗。