自固化载硒磷酸钙骨修复材料的制备及性能

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目的:含硒植骨材料因具有促进骨修复、抗肿瘤、抗菌等生物活性成为当前乃至今后一段时间内临床应用人工植骨材料研发的主要目标之一。目前报道的含硒骨修复材料,载硒方式为简单的表面直接涂层Se单质或离子交换载入SeO32-,这样的载硒方式不能有效控制硒的释放量。而硒作用于人体的生物安全,量的控制至关重要。本文针对将硒元素独特的生物化学功能应用于骨修复领域的前沿问题,将硒以微球封装后与可自固化的磷酸钙骨水泥复合,通过调控封装微球的量、微球直径、微球载药量等方式,以期缓解载入药硒的“突释效应”,控制药物从骨水泥的释放速率,实现可控缓释。方法:以微球的形貌、载药量、包封率及其在模拟体液中的缓释性能为主要指标,对Na2SeO3-SA-CS微球的品质进行评价与分析,并结合原子荧光光谱、红外分析、热重分析及扫描电镜,对Na2SeO3-SA-CS微球进行表征。Na2SeO3-SA-CS微球-磷酸钙骨水泥复合材料的制备,并以固化时间、抗溃散性、可降解性、缓释硒性能等为主要指标进行材料品质筛查。在此基础上,以肉骨瘤MG63细胞为细胞模型,对Na2SeO3-SA-CS微球-磷酸钙骨水泥复合材料的体外抗肿瘤活性进行了一定程度的研究。结果:(1)采用乳化交联法制备Na2SeO3-SA-CS微球,以戊二醛用量、固化温度、亚硒酸钠、海藻酸钠、壳聚糖及氯化钙浓度为变量设计单因素实验,探讨不同变量水平对Na2SeO3-SA-CS微球的载药量和包封率的影响,在单因素基础上设计正交试验,采用SPSS23.0统计软件对正交试验结果进行Duncan多重分析和方差分析以确定最佳的优化工艺组合并进行验证。优化验证后产生两组优化组,其中A4B1C3D4E2优化组微球的成型效果好,相互之间几乎没有粘连,包封率为76.87%和载药量为7.57%,其体外缓释的最终释药量为80%;A4B1C4D4E3组微球的成型度较高,分散性较好,其包封率和载药量分别为80.19%、5.72%,其体外缓释的最终释药量为57.4%。(2)β相骨水泥与Na2SeO3-SA-CS微球复合后初凝时间和终凝时间缩短至4.1min和8.4min,提高了骨水泥的热稳定性、抗溃散能力降解能力,体外缓释1000h后其累积硒释率为12.87%;α相骨水泥与Na2SeO3-SA-CS微球复合后初凝时间和终凝时间缩短至4.3min和9.2min,增强了其热稳定性、抗溃散能力和降解能力,体外缓释1000h后其累积硒释率为27.34%;(3)以缓释1d和7d的Na2SeO3-SA-CS微球-磷酸钙骨水泥复合材料缓释液进行的体外抗肿瘤实验表明,载硒β-TCP体系的CPC与纯CPC对骨瘤MG63细胞的增殖、粘附和细胞外基质矿化抑制作用不明显;载硒α-TCP体系的CPC对肉骨瘤MG63细胞的增殖、粘附及细胞外基质矿化具有明显抑制作用。结论:Na2SeO3-SA-CS微球与可自固化的磷酸钙骨水泥复合缩短了骨水泥的固化时间、提高了其降解能力和抗溃散能力、有效缓解载入药硒的“突释效应”,控制药物从骨水泥的释放速率,实现可控缓释,抑制肉骨瘤MG63细胞增殖。
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