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目的:观察GPR75受体及其调控下游PLC/PKC信号通路对20-HETE诱导乳鼠心肌细胞凋亡作用的影响,探究GPR75受体在20-HETE诱导心肌损伤中的分子、细胞机制。方法:SD乳鼠心肌细胞原代培养,慢病毒转染敲减心肌细胞GPR75基因表达,心肌细胞随机分为:正常对照组（Control组）、GPR75敲减组（sh GPR75组）和20-HETE处理组（100 nmol/L）;其他组别细胞依据不同实验目的,在20-HETE处理前1h,分别加入不同浓度的预处理药物:U73122（1μmol/L）、2-APB（100μmol/L）、GF109203X（1μmol/L）和Apocynin（100μmol/L）,培养24 h后收集细胞进行相关指标检测。应用ELISA法检测IP3含量以及PKC、NADPH氧化酶活性;Fluo-3/AM法检测Ca2+浓度;DHE荧光探针检测ROS含量;JC-1荧光探针法检测线粒体膜电位;Western blot法检测Cyt C、Caspase-3蛋白表达水平;TUNEL荧光染色检测细胞凋亡率。结果:1.敲减GPR75或应用U73122减少20-HETE诱导乳鼠心肌细胞内IP3生成培养的乳鼠心肌细胞使用20-HETE处理后,与Control组相比,细胞内IP3含量由2.78±0.11 ng/ml显著升高至5.14±0.32 ng/ml（P＜0.05）;而敲减GPR75或应用PLC抑制剂U73122处理后,与20-HETE组相比,心肌细胞内IP3含量分别降低至3.26±0.14 ng/ml和3.65±0.18 ng/ml（P＜0.05）。2.敲减GPR75或应用U73122、2-APB降低20-HETE诱导细胞内Ca2+浓度升高与Control组相比,乳鼠心肌细胞使用20-HETE处理后,细胞内Ca2+浓度显著升高2.7倍（P＜0.05）;而敲减GPR75或应用PLC抑制剂U73122以及IP3R抑制剂2-APB处理心肌细胞后,明显降低了20-HETE诱导的Ca2+浓度升高效应（P＜0.05）。3.敲减GPR75抑制20-HETE诱导心肌细胞PKC活性增强作用与Control组相比,乳鼠心肌细胞使用20-HETE处理后,细胞内PKC活性显著增强了1.78倍（P＜0.05）;而敲减GPR75显著抑制了20-HETE诱导PKC活性增强作用（P＜0.05）。4.敲减GPR75或应用GF109203X抑制20-HETE诱导心肌细胞NADPH氧化酶活性增强作用20-HETE处理后,与Control组相比,心肌细胞内NADPH氧化酶活性显著增强了1.64倍（P＜0.05）;而敲减GPR75或应用PKC抑制剂GF109203X处理后,显著抑制了20-HETE诱导的NADPH氧化酶活性增强作用（P＜0.05）。5.敲减GPR75或应用GF109203X、Apocynin减少20-HETE诱导细胞内ROS生成与Control组相比,20-HETE处理组乳鼠心肌细胞内ROS含量显著升高了3.74倍（P＜0.05）;而敲减GPR75、应用PKC抑制剂GF109203X或NADPH氧化酶抑制剂Apocynin处理后,显著减少了20-HETE诱导细胞内ROS生成（P＜0.05）。6.敲减GPR75或应用U73122、GF109203X逆转20-HETE诱导的心肌细胞线粒体膜电位下降心肌细胞线粒体膜电位在使用20-HETE处理后,与Control组相比显著下降了84.63%（P＜0.05）;而敲减GPR75、应用PLC抑制剂U73122或应用PKC抑制剂GF109203X处理后,则逆转了20-HETE诱导细胞内线粒体膜电位下降效应（P＜0.05）。7.敲减GPR75或应用U73122、GF109203X降低20-HETE诱导心肌细胞Cyt C蛋白表达20-HETE处理心肌细胞后,与Control组相比,细胞内Cyt C蛋白表达显著升高2倍（P＜0.05）;而敲减GPR75、应用PLC抑制剂U73122或PKC抑制剂GF109203X处理后,显著降低了20-HETE诱导的细胞内Cyt C蛋白表达升高（P＜0.05）。8.敲减GPR75或应用U73122、GF109203X降低20-HETE诱导心肌细胞Caspase-3蛋白表达与Control组相比,20-HETE处理组乳鼠心肌细胞内Caspase-3蛋白表达显著升高1.8倍（P＜0.05）;而敲减GPR75、应用PLC抑制剂U73122或PKC抑制剂GF109203X处理后,显著降低了20-HETE诱导细胞内Caspase-3蛋白表达升高（P＜0.05）。9.敲减GPR75或应用U73122、GF109203X阻断20-HETE诱导的心肌细胞凋亡作用心肌细胞凋亡率由Control组的3.33%显著升高至20-HETE处理组的54.5%,（P＜0.05）;而敲减GPR75、应用PLC抑制剂U73122或PKC抑制剂GF109203X处理后,与20-HETE组相比,心肌细胞凋亡率分别下降至27.5%、30.3%和32.6%（P＜0.05）。结论:20-HETE由GPR75受体介导,通过PLC/PKC信号通路引起细胞内Ca2+浓度升高及过量ROS生成,导致线粒体功能紊乱,最终诱导心肌细胞凋亡。