【摘 要】
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目的:基于网络药理学方法,探讨大黄治疗儿童肺炎的物质基础及其可能机制,并与传统中药药性理论建立联系;建立脂多糖（LPS）吸入法诱导的肺炎小鼠模型,使用大黄内外治疗方法进行干预,在此基础上测定小鼠血清中白介素4（IL-4）、白介素33（IL-4）和肿瘤坏死因子（TNF-α）含量,并观察小鼠肺组织病理形态以及肺CT改变,探讨大黄不同治法抗炎作用的共同效应指标,为临床中大黄一药两用治疗小儿肺炎提供实验依
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目的:基于网络药理学方法,探讨大黄治疗儿童肺炎的物质基础及其可能机制,并与传统中药药性理论建立联系;建立脂多糖（LPS）吸入法诱导的肺炎小鼠模型,使用大黄内外治疗方法进行干预,在此基础上测定小鼠血清中白介素4（IL-4）、白介素33（IL-4）和肿瘤坏死因子（TNF-α）含量,并观察小鼠肺组织病理形态以及肺CT改变,探讨大黄不同治法抗炎作用的共同效应指标,为临床中大黄一药两用治疗小儿肺炎提供实验依据。材料与方法:1通过中药系统药理学数据库与平台（TCMSP）筛选并收集大黄的潜在活性成分与成分靶点。使用Gene Cards和OMIM数据库平台整合出小儿肺炎的相关靶点,并与成分靶点合并获得大黄治疗小儿肺炎的关键靶点。运用String数据库结合Cytoscape软件对关键靶点进行蛋白相互作用网络构建和分析,使用Glue GO插件进行GO、KEGG富能分析,探析大黄治疗小儿肺炎的作用机制,并结合中药药性理论阐释网络药理结果,为传统中医理论与现代科学方法建立联系。2筛选SPF级小鼠108只,随机分为正常组、对照组1、对照组2、内治组、外治组、地塞米松组,每组18只。除正常组外,其余各组小鼠均通过LPS吸入法建立小鼠肺炎模型。造模后24h开始给药治疗,对照组1小鼠予生理盐水灌胃,对照组2小鼠予玉米面外敷背俞穴,内治组与外治组分别予大黄醇提水溶液灌胃、大黄醇提膏外敷背俞穴,地塞米松组小鼠予地塞米松溶液灌胃,连续治疗7天,并于首次治疗前与末次治疗后进行肺CT检查。在开始治疗后第3、5、7天对各组小鼠分批处死取材,观察小鼠肺组织病理变化;称重法测定肺指数;Elisa法检测小鼠血清中IL-4、IL-33和TNF-α的水平。结果:1.网络药理学结果显示,大黄治疗小儿肺炎的主要活性成分包括泽兰黄醇、大黄酸、决明内酯、胡萝卜醇、β-谷甾醇、芦荟大黄素、儿茶素,作用于36个靶点,主要核心靶点为MYC、JUN、CASP3,通过参与调控细胞凋亡、蛋白质受体结合,干预肿瘤坏死因子通路、trp炎症因子调节通路等治疗小儿肺炎,符合大黄苦寒清热,归大肠经,主泻下治疗小儿肺炎的中药药性。2.一般情况:108只实验小鼠,在实验过程中无死亡,正常组小鼠活泼好动,皮毛光亮,精神状态及饮食情况正常;对照组小鼠在造模后24h即出现活动减少,毛发卷曲无泽;精神状态欠佳,饮食减少、竖毛等表现;各治疗组小鼠一般情况优于对照组,组间无明显差异。3.HE染色后发现,正常组小鼠肺组织表现无异常;对照组小鼠肺组织出现大量炎性细胞浸润、肺泡结构破坏等病理改变;内治组与地塞米松组较对照组相比,炎性细胞数量明显改善,仅有少量炎性细胞浸润;外治组与对照组比较,可见少量炎性细胞,伴有中度瘀血表现。LPS诱导后,各组小鼠肺指数与病理评分较正常组均升高（P<0.05）,治疗后,内治组、外治组与地塞米松组较对照组情况改善（P<0.05）。4.脂多糖诱导后,正常组小鼠肺CT表现无异常,肺部纹理清晰;其他组小鼠在治疗前肺部CT显示均有纹理模糊、紊乱,或出现模糊斑片影的表现;在治疗后第7天,对照组小鼠上述表现加重,内治组、外治疗组与地塞米松组小鼠肺CT情况改善,但仍与正常组有差别;CT参数结果显示,对照组小鼠肺体积减小,CT值升高,治疗后情况改善,各治疗组间未见明显差异（P<0.05）。5.脂多糖诱导后,对照组小鼠血清中IL-33和TNF-α含量升高,并于治疗后第5天达到峰值。药物干预后,各治疗组小鼠IL-33和TNF-α含量下调,且以地塞米松组效果最佳（P<0.05）;IL-4含量降低,地塞米松组与内治组小鼠在第5天与第7天较对照组增加,（P<0.05）,外治组未见效（P>0.05）。结论:1.大黄对小儿肺炎疾病进程中的炎症、细胞凋亡等可能具有调节作用,并符合传统中药药性理论。2.大黄内治与外用均能有效减轻LPS诱导小鼠肺组织炎症。3.大黄对LPS诱导肺炎小鼠的治疗机制可能与调节促炎因子的异常释放及维持抗炎/促炎因子稳态有关。4.IL-33和TNF-α炎症因子可作为大黄内治与外用的共同效应指标。
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