水稻亚种分化基因OsNPF7.2参与硝酸盐转运功能研究

来源 :中国科学院大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:zhenming1215
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
提高作物氮利用效率对减少氮肥使用至关重要,在水稻中,硝酸盐转运蛋白、铵盐转运蛋白及氮同化相关的酶类对于提高氮利用效率起重要作用。亚洲栽培稻主要分为籼稻和粳稻两种亚型,已有研究表明,籼稻表现出比粳稻更高的氮利用效率。之前发现编码水稻硝酸盐转运蛋白基因OsNPF6.5(OsNRT1.1B)具有籼稻和粳稻亚种分化特性,并且籼稻型OsNRT1.1B基因受到人工驯化选择,该基因部分解释了水稻籼粳亚种间氮利用差异存在的原因。那么在水稻漫长的进化过程中,籼粳稻亚种间还有哪些基因在氮利用效率差异中发挥作用值得进一步探索。  本研究中,我们利用美国农业部(USDA)在过去100多年从全世界不同国家收集的水稻微核心种质的重测序信息以及已发表公布的野生稻和栽培稻重测序信息,通过对编码氮吸收及转运(硝酸盐转运蛋白、铵盐转运蛋白)、同化利用(硝酸还原酶、谷氨酰胺合成酶等酶类)相关基因进行籼粳分化和进化选择分析,共得到6个基因存在籼粳稻亚种间分化并可能受到进化选择。OsNPF7.2基因是其中之一,表达分析表明,OsNPF7.2在根中具有较高表达,OsNPF7.2promoter∷GUS转基因植株染色及原位杂交实验分析表明,OsNPF7.2主要在根部中柱细胞中表达。OsNPF7.2在植物体内表达受到硝酸盐及高氮诱导。体外爪蟾细胞活性实验表明,OsNPF7.2在低氮和高氮条件下均可以转运硝酸盐。为了进一步鉴定OsNPF7.2的功能,我们通过TALEN及CRISPR-Cas9系统创制了OsNPF7.2基因突变体,osnpf7.2突变体在正常水培条件下与野生型相比表现出明显的生长弱势。通过对野生型和osnpf7.2突变体总氮含量的测定,发现osnpf72突变体根中氮浓度上升,而地上部分氮浓度下降。另外,通过15N吸收实验表明,OsNPFZ2的突变对植株根部硝酸盐吸收速率没有影响,但主要影响了硝酸盐从根部往地上部分转运。同时,OsNPF7.2发生突变时也导致钾离子浓度在根部上升,地上部分下降。  进一步在不同氮源水培条件下对野生型和osnpf72突变体的表型进行了观察,发现在铵-硝混合、纯硝酸盐和纯铵盐条件下,osnpf7.2突变体与野生型相比均表现出一定的生长弱势。而osnpf7.2突变体在铵盐和硝酸盐等比例混合条件下与野生型相比表现出的生长劣势大于纯硝条件。通过对多个氮利用相关基因包括编码硝酸盐转运蛋白、铵盐转运蛋白、硝酸还原酶的转录水平表达差异的检测,我们发现在铵-硝混合条件下的基因表达差异数量要大于纯硝酸盐培养条件,表明OsNPF7.2在不同氮源条件下对其它氮利用相关基因表达的影响不一致,这可能是导致不同氮源条件下osnpf7.2突变体与野生型生物量差异不同的原因。  由于OsNPF7.2具有籼粳分化的特点,利用籼粳稻染色体单片段代换系材料15N标记的硝酸盐吸收转运实验结果显示,籼稻型片段代换系比粳稻型受体亲本具有更强的硝酸盐转运能力。另外,OsNPF7.2的过表达植株在田间表现出比野生型具有更强的分蘖能力,导致单株产量增加。这些结果显示,OsNPF7.2对提高水稻氮利用效率具有潜在的应用价值。
其他文献
玉米黄质,或称玉米黄素(Zeaxanthin,3,3-二羟基-β-胡萝卜素),脂溶性化合物,属叶黄素类类胡萝卜素。玉米黄质分子中含有40个碳和11个共轭双键,使其具有鲜明的颜色和强抗氧化性。由于其独特的化学性质,玉米黄质在预防眼睛黄斑退化所致失明与老年性白内障、预防部分肿瘤的发生和发展、减少某些心血管病的危险发生方面具有显著作用。作为三大主要粮食作物之一的玉米,其籽粒中玉米黄质含量丰富,通过基因工
学位
在干旱、盐、极端温度、化学毒害和氧化胁迫等对植物生长的不利因素中,干旱是所有非生物胁迫中对植物生长影响最大的。木薯(Manihot esculenta Crantz)是大戟科块根作物,与马铃
纳米金属材料因具有独特的表面等离子体共振效应,已被广泛应用于生物医学、材料医学以及光电器件等领域,其中基于表面等离子体共振的金属表面荧光增强效应是近年来的研究热点之
MOSFET器件尺寸的按比例缩小导致栅氧化层厚度越来越小,同时衬底掺杂浓度不断提高,而栅电压的减小相对较弱,从而使得器件沟道表面的纵向电场越来越强,沟道内载流子被限制在一个由
摘要:中职德育课教学,一般一节课都是在“点”上进行的,但人生活动复杂,往往是由一个个“点”构成的“面”。如果课堂只是讲“点”而没有“面”上的铺开、探讨,很明显,这样的教学安排对学生认知的整体性是不足的。为了弥补这种不足,笔者尝试设计“课堂小讲座”形式,融汇各个德育知识点,以生活案例为情境,以活动体验为形式,设计系列课程讲座,实现“小讲座,大渗透;小切口,大教育”的德育价值。  关键词:中职德育课;
苦荞(Fagopyrum tataricum)又称鞑靼荞麦,属双子叶植物蓼科荞麦属一年生草本植物,是我国荞麦的主要栽培种之一,广泛分布于我国西南一些高寒、边远、干旱山区和少数民族聚居地。苦荞作为药食两用植物,除含有丰富的营养物质外,还富含具有药用和保健价值的类黄酮物质(主要成分为芦丁)。苦荞类黄酮的生物合成受代谢途径关键酶和转录因子的共同调节。作为植物转录因子家族之一的MYB转录因子,功能众多,除
随着集成电路的发展,传统的器件尺寸将接近其物理极限,越来越多的人开始研究利用一维纳米材料替代传统硅材料来制作器件。随着互连程度越来越复杂,low-k材料和铜互连技术也已成
植物在应对缺铁胁迫时产生一系列复杂的适应机制。本论文阐述了拟南芥蛋白精氨酸甲基转移酶SKBl(Shkbindingprotein1,动物中甲基转移酶PRMT5的同源基因)催化核小体核心组蛋白
学位