沙棘作为一种水土保持、防风固沙的优良树种,在我国三北和西南地区土地沙漠化防治中起到重要作用。但自古以来沙棘病虫害严重,传统化学药剂方法不能有效防治病虫害的情况下,通过基因工程培育抗病的转基因沙棘品种成为主要研究方向。几丁质是病原真菌细胞壁和昆虫外壳的主要组成成分。几丁质酶能破坏和降解几丁质,致使病原真菌和昆虫死亡。作为一种PR蛋白,几丁质酶还具有广泛的生理活性,在植物抗病性方面起重要作用。另据报道几丁质酶的转基因植物具真菌抗性,为通过转入几丁质酶基因培育抗病性沙棘品种提供理论基础。本文以沙棘为材料,从染病植株上分离病原真菌,并侵染健康植株,确定了沙棘干缩病病原真菌种类;首次在诱导后植物叶片上提取出沙棘几丁质酶蛋白,并验证其抑菌效果;运用RT-PCR和反向PCR技术,首次克隆出沙棘ClassIII和ClassI几丁质酶基因,并测序进行序列分析。沙棘ClassIII几丁质酶基因等电点为5.90,预测分子量为31.758KD;其氨基酸序列含有几丁质酶18家族的活性位点,序列为LDGIDFDIE,活性中心为E(Glu);蛋白成熟位点在25-26的A-G之间。沙棘ClassI几丁质酶基因等电点为8.45,预测分子量为32.293KD;其氨基酸序列含有一个几丁质结合蛋白,位置在20-61,序列为AEQCGGQAGGRVCRVCPGGACCSKFVRCGNTADYCGSG CQSQCSS。建立蛋白的二级和三级结构模型。