Id2和Id4在小鼠卵巢中的表达模式和功能研究

来源 :四川农业大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:ljc20090204
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本实验旨在研究转录因子Id在小鼠卵巢中的表达情况和功能。取7日龄、14日龄、21日龄和成年小鼠卵巢后,采用免疫组织化学染色和荧光定量PCR,分析Id在不同发育阶段卵巢上的表达。利用细胞体外培养体系收集生发泡期(germinal vesicle,GV),生发泡破裂期(germinal vesicle breakdown,GVBD),第一次减数分裂中期(metaphase I,(MI)和第二次减数分裂中期(metaphase II,MII)的卵母细胞及其周围的颗粒细胞,通过荧光定量分析Id2和Id4在不同发育阶段的卵母细胞与颗粒细胞的表达。获取条件性敲除卵巢中Id2和Id4的小鼠模型,通过卵巢增殖凋亡和ELISA血液激素水平检测,结合卵巢发育,及小鼠表型分析Id在卵巢中的作用。实验结果如下:(1)小鼠成年,21日龄,14日龄的卵巢中,Id在7日龄和14日龄小鼠卵巢的表达水平高(P<0.05);(2)小鼠GV,GVBD,MI和MII期的卵母细胞和颗粒细胞中,Id2在GV期的卵母细胞和颗粒细胞表达水平均明显提高(P<0.05);Id1,3,4在四个时期卵母细胞和颗粒细胞的表达水平无差异;(3)与对照组野生型的小鼠相比,雌性Amh cre+Id2F/F敲除小鼠不育,且体型要小,体重要轻1/2;(4)条件性敲除Id2的小鼠颗粒细胞增殖凋亡正常,但血清中含雌激素水平极高。敲除小鼠卵巢中,没有看到有腔卵泡,只有次级卵泡,髓质几乎没有。且敲除小鼠的血清中雌激素水平很高,认为对骨骼有影响。综上所述,Id2促进哺乳动物卵巢颗粒细胞的分化发育,通过影响下游雌激素合成酶(如芳香酶)影响颗粒细胞中雌激素的生成,或者还通过影响颗粒细胞表面雌激素受体的表达,影响血清中雌激素水平;Id4对哺乳动物卵巢发育的刺激作用不显著,通过其他转录因子功能补偿。
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