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目的：构建加二氯化钴（CoCl2）后的人脑神经胶质U251细胞的缺氧模型，并对之评价后，讨论加EPO后对缺氧模型U251细胞增殖、凋亡的影响，以及对CDK1、CyclinH、Caspase3、Caspase4等基因转录水平的变化，为探讨EPO在新生儿缺血缺氧性脑病等疾病及神经保护的作用机制研究奠定实验基础。 方法：1.CCK-8法检测不同时间、不同浓度CoCl2对细胞活性的影响。2.采用实时荧光定量PCR（Real-time Quantitative PCR，qPCR）法检测不同浓度CoCl2作用下各组细胞中HIF-1αmRNA表达的变化。3.细胞流式术测定CoC12对U251细胞活性氧（ROS）水平的影响。4.细胞流式术测定CoC12对U251细胞凋亡率的影响。5.缺氧模型构建成功后，CCK-8法检测缺氧条件下EPO对U251细胞增殖的影响。6.依据上述CCK-8及缺氧模型构建实验结果选出CoC12和EPO的最佳浓度。7.细胞流式术检测缺氧条件下EPO对U251细胞凋亡能力的变化的影响。8.采用高通量测序技术筛选CoCl2组和CoCl2+EPO组的转录组的差异表达。9.qPCR法对高通量测序技术筛选出的转录组的差异表达基因mRNA进行验证。 结果：1.应用CoCl2构建细胞缺氧模型，并通过CCK-8实验筛选出CoCl2的最佳浓度为400μmol/ml作用48h；qPCR法检测得出随着CoCl2浓度的增加HIF-1αmRNA的表达量越高；通过细胞流式术得出加氯化钴诱导后细胞凋亡率升高及活性氧(ROS)水平阳性程度增强。2.CCK-8实验检测得出EPO的最佳浓度为75IU/ml作用48h；通过细胞流式术检测到细胞凋亡能力降低。3.采用高通量测序技术筛选出CoCl2组和CoCl2+EPO组的转录组的差异表达mRNA：CDK1、CyclinH、Caspase3、Caspase4。4.采用qPCR验证，得出CDK1、CyclinH mRNA表达量增高，Caspase3、Caspase4mRNA表达量降低，和高通量测序结果相符。 结论：成功的构建了CoCl2对人脑神经胶质U251细胞的细胞缺氧模型，并研究得出EPO可以在缺氧环境下促进U251细胞的增殖，抑制凋亡。并上调CDK1、CyclinH的转录，下调Caspase-3、Caspase-4的转录。因此，证明了EPO对神经胶质细胞具有保护作用。