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目的:肺泡II型上皮细胞(alveolar epithelial type II cells,AECIIs)是肺组织中最关键的干细胞,在支气管肺发育不良(bronchopulmonary dysplasia,BPD)的恢复中起着重要作用。Yes相关蛋白(Yes-associated protein,YAP)作为Hippo信号通路下游关键的转录辅激活物,对各种干细胞生物学都有调节作用,可参与调节肺泡II型上皮细胞(AECIIs)的增殖和分化。YAP是关键的转录因子,可调控多条细胞信号通路的传导,而Wnt通路作为其中之一;而Wnt 3a/β-catenin介导的经典信号通路,在维持肺泡形态结构和肺泡上皮细胞增殖及转分化方面充当关键的作用。BPD是肺处于囊性发育阶段的早产儿常见的严重肺发育障碍,具有较高的病死率。病理上可表现出肺泡间隔增厚,肺泡结构简单化。那么YAP、Wnt3a和β-catenin在BPD病理条件下是否相关,以及它们的调控机制是什么?方法:将正常分娩的新生大鼠(连同母鼠)于生后24h内随机分为模型组和对照组,模型组放入85%的氧气中构建慢性肺损伤模型,对照组置于空气中,分别于1、3、7、14和21天收集肺组织,利用PCR、免疫印迹及免疫荧光双染等方法在基因转录和翻译水平对其进行检测。提取原代AECIIs,基因水平增高或者降低YAP研究其对AECIIs的增殖和转分化的调控。单独改变Wnt3a或者共同改变YAP的基因表达来研究YAP是否通过Wnt/β-catenin信号途径参与AECIIs的增殖和分化。通过PCR、免疫印迹以及免疫荧光检测相关基因的转录与翻译情况。结果:在体内实验表明,模型组肺组织逐渐出现肺泡间隔增厚,肺泡棘消失,肺泡腔增大,肺泡数目减少,肺泡结构简单化。与正常组肺组织相比,模型组肺组织中YAP、Wnt 3a和β-catenin的表达在7d后明显降低(p<0.05),SPC的表达水平升高(p<0.05),而AQP5的表达水平降低(p<0.05)。在体外实验中,当YAP过表达时(p<0.05),促进了AECIIs的增殖和向AECI的转分化(p<0.05),反之亦然。此外,过表达YAP可促进β-catenin核转移(p<0.05),而对Wnt3a没有影响;Wnt3a表达的变化(p<0.05)逆转了YAP对β-catenin的作用(p<0.05),而不改变其表达。结论:YAP、Wnt 3a和β-catenin均参与高氧诱导的慢性肺损伤,尤其是肺泡损伤的病理过程,YAP和Wnt3a均可独立调控β-catenin促进AECIIs的增殖和AECIIs向AECIs的转分化,而YAP和Wnt3a并无相互调控关系,且YAP通过调控β-catenin可激活部分Wnt3a/β-catenin信号通路进而促进AECIIs的增殖和AECIIs向AECIs的转分化。因此,YAP可能作为改善高氧诱导的BPD中AECIIs增殖和分化的候选调控靶点。