目的:红细胞（Red Blood Cell,RBC）是人体内数量最多的血液细胞,在正常成人体内数量超过30万亿,而且在血循环中的生存周期可长达120天之久。许多药物进入人体后会与红细胞发生相互作用,红细胞在这些药物的体内转运和代谢过程中扮演着天然载体的作用。研究者由此想到主动利用红细胞作为药物载体,构建基于活红细胞的长循环药物递送系统（Drug Delivery System,DDS）。红细胞膜作为磷酯双分子层,在不同的血浆渗透压条件下具有一定的伸缩弹性。当血浆渗透压较低时红细胞膜能够可逆性开放细胞膜上的孔道,在正常血浆渗透压下又能恢复正常。利用红细胞的这种性质可以方便地将药物载入红细胞。糖皮质激素地塞米松（Dexamethasone,DS）口服可有效减缓囊性纤维化等肺部疾病的发展,但长期使用会引起许多严重的不良反应,如高血压,生长障碍,葡萄糖耐受不良和骨质疏松等。意大利Ery Del公司的研究者依托其专有的红细胞载药设备（Red Cell Loader?）,将非扩散性前药地塞米松磷酸钠（Dexamethasone Sodium Phosphate,DSP）包封在人的活红细胞中,然后回输至患者体内。包封在红细胞内的无活性的DSP在红细胞内酶的作用下缓慢发生去磷酸化,转化为可扩散的有活性的DS,并从红细胞中缓慢释出。该技术一次处理50-70ml全血并回输给患者,长时间维持DS在较低的浓度水平,药效可以维持2-3周,有效避免长期使用糖皮质激素带来的副作用。本文依托课题组前期以Red Cell Loader?为蓝本仿制的红细胞载药专用设备,制备载DSP的活红细胞长循环给药系统并开展相关的评价性研究。方法:首先建立RBC载DSP长循环给药系统的HPLC药物含量测定方法,以色谱峰保留时间、分离度、对称因子和理论塔板数等为考察指标,对检测波长、色谱柱、流动相、柱温、流速等色谱条件进行筛选,并通过专属性、线性、精密度、稳定性和回收率等实验进行方法学验证;并依托课题组仿制的红细胞载药专用设备制备载地塞米松磷酸钠红细胞（DSP-RBC）长循环给药系统,从载药时间、封闭液组成、封闭时间、药物溶液渗透压等方面进行工艺优化;然后从血液学参数、形态学、表面抗原的变化及载药RBC的体内存活情况等方面对DSP-RBC长循环给药系统进行表征和评价;最后通过大鼠体内初步药物代谢动力学研究,考察DSP-RBC长循环给药系统的体内缓释能力。结果:本文建立的DSP-RBC长循环给药系统的HPLC主药DSP含量测定方法,DSP在2.54μg/ml～100.04μg/ml浓度范围内与峰面积比值呈良好的线性关系,回收率>98%,供试溶液在4℃和室温下放置24 h均稳定,精密度符合要求,可用于DSP-RBC中DSP含量的测定。依托自制的红细胞载药专用设备成功制备了DSP-RBC长循环给药系统并优化了制备工艺。通过全自动血细胞分析仪检测,DSP-RBC血液学参数基本正常;通过扫描电镜观察,DSP-RBC形态基本正常;渗透脆性和湍流脆性实验结果表明载药过程对红细胞膜的伸缩弹性影响较小;通过流式细胞分析对红细胞膜表面的Na+/K+-ATP酶和磷酯酰丝氨酸（Phosphatidyl Serine,PS）进行检测,发现载药过程使红细胞膜表面Na+/K+-ATP酶水平下降、PS水平显著上升。对DSP-RBC在大鼠体内的生存能力进行考察,与未载药红细胞相比,24h时载药红细胞的存活率有所下降,在11d时存活率相当。大鼠初步药物代谢动力学实验验证了本文制备的DSP-RBC长循环给药系统具有明显的体内缓释效果。结论:本文系国内首次依托红细胞载药专用设备开展RBC包载DSP研究,优化了处方和制备工艺,并对优化的处方进行表征,通过药物代谢动力学实验验证了缓释效果。