【摘 要】
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目的评估丹参酮ⅡA干预对缺氧条件下心肌前体细胞存活和归巢能力的影响并探讨其相关机制,期望为丹参酮ⅡA在心肌再生中的应用提供有价值的理论和实验依据。方法1、用不同浓度的氯化钴（50、100、150、200、250、300μmol/L）处理大鼠胚胎心肌H9c2细胞48h,用MTS法评估氯化钴对H9c2细胞增殖的影响,流式细胞法分析氯化钴对H9c2细胞凋亡的影响,根据检测结果选择合适浓度的氯化钴进行后续
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目的评估丹参酮ⅡA干预对缺氧条件下心肌前体细胞存活和归巢能力的影响并探讨其相关机制,期望为丹参酮ⅡA在心肌再生中的应用提供有价值的理论和实验依据。方法1、用不同浓度的氯化钴（50、100、150、200、250、300μmol/L）处理大鼠胚胎心肌H9c2细胞48h,用MTS法评估氯化钴对H9c2细胞增殖的影响,流式细胞法分析氯化钴对H9c2细胞凋亡的影响,根据检测结果选择合适浓度的氯化钴进行后续各项实验。2、分别以氯化钴、丹参酮ⅡA、丹参酮ⅡA+氯化钴、丹参酮ⅡA+氯化钴+AG126（ERK1/2通路抑制剂）处理H9c2细胞48h,同时设置不加药的对照组,进行以下相关检测:（1）MTS法检测H9c2细胞增殖情况;（2）流式细胞法分析H9c2细胞凋亡情况;（3）划痕法评估H9c2细胞向损伤区域迁移情况;（4）Western blot法检测H9c2细胞中ERK1/2通路相关蛋白（ERK1/2、p-ERK1/2、HIF-1α、cleaved caspase-3、MMP-9）的表达。结果1、当浓度不低于200μmol/L时,氯化钴既能剂量依赖性地抑制H9c2细胞的增殖（P＜0.05）,也能剂量依赖性地引发H9c2细胞的凋亡（P＜0.05）。鉴于上述结果,选用250μmol/L氯化钴构建H9c2细胞缺氧损伤模型进行后续实验。2、与氯化钴组比较,丹参酮ⅡA+氯化钴处理的H9c2细胞增殖加快（P＜0.05）、凋亡减少（P＜0.05）、向损伤区迁移能力增强（P＜0.05）,且在此过程中,ERK1/2表达无明显变化（P＞0.05）,p-ERK1/2、HIF-1α、MMP-9表达明显增多（P＜0.05）,cleaved caspase-3表达明显减少（P＜0.05）。3、与丹参酮ⅡA+氯化钴组比较,丹参酮ⅡA+氯化钴+AG126处理的H9c2细胞增殖减慢（P＜0.05）、凋亡增加（P＜0.05）、向损伤区迁移能力减弱（P＜0.05）,且在此过程中,ERK1/2表达无明显变化（P＞0.05）,p-ERK1/2、HIF-1α、MMP-9表达明显减少（P＜0.05）,cleaved caspase-3表达明显增加（P＜0.05）。结论丹参酮ⅡA能促进缺氧环境下心肌前体细胞的存活及向心肌损伤区归巢,其机制与其能够调控ERK1/2通路有关。
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