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来源于胚胎时期中胚层的成纤维细胞是结缔组织内主要细胞之一。其具有一定的分化能力，参与创伤修复、诱导成骨和成脂肪过程，并在一定条件下与纤维细胞和间充质干细胞可以相互转化。脂肪组织作为内分泌器官参与机体的的许多生理和病理过程。本课题的另一项研究已证明，分娩期山羊宫颈中含有脂肪细胞，能够分泌影响分娩期子宫颈成熟和分娩的前列腺素E2（PGE2）,但目前关于子宫颈中细胞的分化能力方面国内外尚未报道。因此本实验的目的就是验证分娩期小鼠宫颈中是否也含有脂肪细胞；体外分离和鉴定小鼠宫颈中的成纤维细胞，并对此细胞进行分化脂肪细胞的培养，以3T3-L1小鼠成纤维细胞的分化进行形态对比观察，以揭示宫颈中脂肪细胞的来源。本实验以昆明小白鼠及3T3-L1小鼠成纤维细胞为研究对象。采集分娩时和分娩后小鼠宫颈样本，制作冰冻切片并进行油红O染色；在无菌条件下取空怀小鼠子宫颈，采用组织外植块培养的方法在含胎牛血清的DMEM培养基中进行子宫颈细胞培养，利用不同细胞对胰蛋白酶消化的敏感度不同以对子宫颈成纤维细胞进行分离，通过细胞形态和波形蛋白抗体及角蛋白抗体的细胞免疫化学鉴定成纤维细胞；对3T3-L1小鼠成纤维细胞进行培养、冻存及复苏，并采用含有胰岛素、地塞米松、IBMX以及罗格列酮的低血清浓度DMEM培养基对已分离的成纤维细胞以及已知的3T3-L1小鼠成纤维细胞进行前脂肪细胞或脂肪细胞的分化，通过细胞形态和油红O染色进行定性检测。研究结果表明，分娩时小鼠子宫颈组织冰冻切片油红O染色呈阳性，组织中含有前脂肪细胞或脂肪细胞。培养的原代成纤维细胞沿着组织块向外发散成长，形成细胞晕，细胞成梭形或多角形。分离的细胞用波形蛋白抗体及角蛋白抗体进行荧光鉴定，波形蛋白鉴定呈阳性，角蛋白鉴定呈阴性，说明已成功分离出了成纤维细胞。在分化过程的第4天，即可观察到少量细胞中含有油红O阳性的脂肪滴，在第10天，细胞中开始出现的大脂肪滴聚集，这表明部分细胞已分化成为成熟脂肪细胞。对照组中3T3-L1小鼠成纤维细胞复苏后的存活率为76％。在3T3-L1小鼠成纤维细胞分化为脂肪细胞的过程中，在第4天也可见少量细胞中出现脂肪滴，第8天的细胞中开始出现大脂肪滴聚集，这表明部分细胞已分化为成熟脂肪细胞,但其分化细胞的数量要少于实验组的。本研究成功从小鼠子宫颈组织的原代细胞培养中分离出了成纤维细胞，并使其在体外培养的条件下分化成了成脂肪细胞。