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本实验应用全反式维甲酸(ATRA)诱导雌激素受体阳性的乳腺癌MCF-7细胞,RT-PCR检测MAGE家族分子的表达,研究MAGE家族分子在全反式维甲酸诱导分化作用中表达情况。结果发现分化相关亚家族(MAGE家族碱性蛋白)随分化诱导而表达增强,相反,肿瘤相关亚家族(MAGE家族酸性蛋白)随分化诱导而表达降低。同时,利用FCM发现在浓度为10-6mol/L的ATRA作用下,乳腺癌MCF-7细胞出现G1期阻滞;利用MTT法发现浓度为10-6mol/L的ATRA对于MCF-7细胞具有显著的抑制作用;利用Giemsa染色检测ATRA对于MCF-7细胞的凋亡作用。以上实验初步证明了MAGE基因家族的转录水平调控模式的预测结果的可信性,为完善MAGE家族分化相关亚家族和肿瘤相关亚家族分类和蛋白酸碱分类的假说提供了有价值的信息,为下一步研究MAGE家族蛋白与细胞增殖、分化、凋亡的关系,建立它们之间的网络联系奠定了基础。同时,也在从转录模式上对基因家族进行再分类研究基因功能做出了尝试。本实验也为研究ATRA与乳腺癌治疗的关系,为临床上使用ATRA治疗实体瘤奠定了一定基础。
此外,对restin调节细胞周期的机制进行了初步的研究。由于restin的高表达伴随细胞G1期的阻滞,而CyclinD1是调节细胞周期由G1期向S期转变的重要分子。于是,利用RT-PCR同时检测了维甲酸诱导MCF-7细胞分化过程中不同时期restin和CyclinD1的表达情况。结果restin表达是从无到有,逐渐增强,CyclinD1的表达则在诱导24h后下降。这种时间上的一致性提示restin与CyclinD1的转录调控有密切联系。进一步研究restin与CyclinD1的转录调控关系将会为丰富restin的功能和作用方式提供更多的信息,这部分实验正在进行中。