精子发生与睾丸的健康发育是雄性生殖功能的先决条件,精子的整个发生过程与周围支持细胞的调控作用密切相关,睾丸支持细胞可与生精小管内的生殖细胞直接发生作用,也可以通过其分泌的产物滋养生殖细胞,对生殖细胞的同步发育进行调控继而影响精子的发生。支持细胞的功能缺失会直接导致精子发生的异常,所以研究调控因子如何影响支持细胞及其生理功能是当前研究的热点问题。BMP4作为TGF-β家族的成员,在胚胎发育过程以及各种细胞的增殖分化方面起着重要的作用。有研究表明,Id2基因可以作为BMP4的下游基因维持胚胎干细胞的干性并与细胞的增殖有关。我们通过山羊睾丸组织转录组测序的结果分析发现,BMP4与Id2基因仍具有靶向关系,但在山羊睾丸支持细胞中Id2是否可参与BMP4诱导的细胞功能改变,其具体的调控作用方式是怎样的,还有待进一步研究。论文以大足黑山羊睾丸支持细胞为研究对象,通过体外培养,采用免疫荧光、BMP4干扰、过表达、q PCR和Western Blot等技术对BMP4是否通过Id2对山羊睾丸支持细胞进行调控以及他们的调控关系进行验证。得到了如下结果:1.通过胶原酶、胰酶两步酶消化法分离山羊睾丸支持细胞,差速贴壁法纯化细胞,并用HE、弗尔根以及免疫荧光对支持细胞进行鉴定以及活力检测,支持细胞纯度达到98%以上。2.经检测BMP4在山羊不同年龄支持细胞均有表达,且2月龄显著高于0、1、3月龄（p<0.01）,说明BMP4可能在山羊青春期对睾丸的发育起到一定的作用。3.BMP4可以促进山羊睾丸细胞中的增殖,且浓度越大,其增殖作用越明显,其中BMP4浓度为200 ng/m L、培养时间为72 h时睾丸支持细胞增殖最多。4.干扰片段对BMP4干扰后显著降低了PCNA、Id2的基因水平以及Id2蛋白水平表达量（p<0.05）。无处理对照组与干扰组相比,PCNA的基因表达量降低了42%,差异显著（p<0.01）,Id2基因表达量与对照组相比有所下降,但没有显著差异（p>0.05）,但其蛋白水平对照组相比下降了39.2%,差异显著（p<0.05）。结果表明干扰BMP4后,支持细胞增殖能力受限且能够对Id2进行调控。5.BMP4干扰后,通过流式细胞仪对其增殖周期进行检测,发现干扰组与NC组相比增殖指数显著下降（p<0.05）。6.对BMP4过表达处理后,Id2的基因表达量是无处理阴性对照组的1.25倍（p<0.05）。Id2的蛋白水平对照组相比增多了18%（p<0.05）。表明BMP4对Id2存在正向调控作用。7.干扰Id2的实验组,相对只过表达BMP4再干扰Id2实验组,PCNA基因以及蛋白的表达水平显著降低了（p<0.05）,进一步证明了BMP4可以调控Id2的基因以及蛋白水平影响支持细胞的增殖。8.BMP4过表达后P38 MAPK蛋白的磷酸化水平相比对照组显著上升42%（p<0.05）,说明BMP4过表达还可以激活P38MAPK蛋白通路。综上所述,BMP4可以通过上调Id2的基因及蛋白水平促进山羊睾丸支持细胞的增殖。本研究为明确BMP4在山羊睾丸支持细胞上的分子机制以及生理功能提供基础。