核因子Y(NF-Y)对褐飞虱生长发育和生殖的调控作用

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核因子Y(Nuclear Factor Y,NF-Y)是一种异源三聚体转录因子,几乎所有真核生物中的NF-Y都具有与CCAAT元件结合的能力,也被称为CCAAT结合因子(CCAAT-Binding Factor,CBF)。已有研究表明,动物的NF-Y复合体在细胞增殖和凋亡、肿瘤和癌症的发生、应激反应、生长发育等许多生命活动中必不可少。但是,关于昆虫NF-Y转录因子的研究至今鲜有报道。翅二型昆虫褐飞虱(Brown Planthopper,BPH),Nilaparvata lugens,隶属于半翅目(Hemiptera),飞虱科(Delphacidae),是亚洲水稻主要害虫之一。本文利用序列分析、时空表达模式分析、RNA干扰(RNA-interference,RNAi)等手段对NF-Y在褐飞虱中的生物学功能进行初步研究,得到了以下结果:(1)鉴定得到了褐飞虱的三个NFY亚基,即NlNF-YA、NlNF-YB和NlNF-YC。NlNF-YA、NlNF-YB和NlNF-YC的开放阅读框(Open Reading Frame,ORF)长度分别为1002、609和1011碱基(bp),可编码的多肽分别含有333、202和336个氨基酸残基。系统发育分析表明NlNF-YA、NlNF-YB和NlNF-YC分别与同是半翅目昆虫的茶翅蝽(Halyomorpha halys)、烟粉虱(Bemisia tabaci)和豌豆蚜(Acyrthosiphon pisum)的同源性最高;(2)时空表达模式分析表明,NlNF-YA、NlNF-YB和NlNF-YC广泛分布于四龄若虫的各个组织部位,在各个龄期也均有表达,且在卵期显著高表达;(3)RNA干扰介导的沉默实验显示,四龄若虫NlNF-YA、NlNF-YB或NlNFYC的沉默会显著延长若虫在五龄阶段的龄期,并导致若虫的羽化率降低。添加20-羟基蜕皮激素(20E)可以特异性地回补由于沉默NlNF-YA引起的成虫蜕皮缺陷,表明NlNF-Y可能参与了褐飞虱蜕皮激素信号传导途径的调控;(4)沉默NlNF-YA、NlNF-YB或NlNF-YC导致褐飞虱前、后翅萎缩以及中度畸形,同时造成了长翅型褐飞虱间接飞行肌的装配异常;(5)沉默NlNF-YA、NlNF-YB或NlNFYC显著降低雌成虫产卵量,并且导致卵无法正常发育。本文探究了NF-Y转录因子对褐飞虱生长发育的调控作用和对其生殖能力的影响,为深入理解半翅目昆虫的NF-Y转录因子的生物学功能提供理论依据。
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