康宁霉素对蝴蝶兰灰霉病菌的防治机理研究

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木霉是一类重要的生防菌,Peptaibols是一类富含α-氨基异丁酸(α-aminoisobutyricacid, Aib)的特殊抗菌肽,具有广谱杀菌作用,对某些真菌、原生动物,耐药性细菌都有杀灭作用。蝴蝶兰灰霉病是近几年来在园艺植物上危害比较严重的一种病害。本文以拟康氏木霉生防菌株SMF2分离得到的一种新的peptaibols抗菌肽——康宁霉素(trichokonins, TKs)为研究对象,以蝴蝶兰灰霉病菌为供试病原菌,研究了康宁霉素对蝴蝶兰灰霉病的防治机理。结果如下:1.蝴蝶兰灰霉病的病原菌为灰葡萄孢菌(Botrytis Cinerea),属于半知菌亚门,丝孢目。单孢分离蝴蝶兰灰霉病菌,采用形态学和分子生物学手段相结合对其进行鉴定。结果表明,蝴蝶兰灰霉病菌的有性态和无性态分别与GenBank中报道的富克尔核盘菌(Botryotinia fuckeliana)、灰葡萄孢菌(Botrytis Cinerea)同源性均达到99.8%,结合形态学特征确定蝴蝶兰灰霉病病原菌有性态为富克尔核盘菌(Botryotinia fuckeliana),属于子囊菌亚门,柔膜菌目。无性态为灰葡萄孢菌(Botrytis Cinerea),属于半知菌亚门,丝孢目。2.康宁霉素对蝴蝶兰灰霉病的防治机理主要包括三个方面:杀菌作用、诱导抗病性、促进植物生长。测定了康宁霉素对蝴蝶兰灰霉病菌菌丝生长、孢子萌发、菌核生长及菌核萌发、菌丝可溶性蛋白含量、菌丝电导率和内溶物的影响。结果表明,康宁霉素能抑制灰霉病菌的菌丝生长、孢子及菌核萌发,使病原菌细胞膜的渗透性增加,可溶性蛋白含量减少。测定了康宁霉素诱导后蝴蝶兰叶片中POD、PPO、PAL等防御酶活性的变化,SOD、CAT、MDA抗性相关酶含量的变化,病程相关的β-1,3-葡聚糖酶、几丁质酶的活性变化。结果表明康宁霉素诱导处理能提高蝴蝶兰叶片内POD、PPO、PAL、SOD、CAT等防御酶及抗性相关酶的活性,降低有害物质MDA的含量。康宁霉素诱导处理后病程相关的酶活性也有所增加。实验过程中发现施用康宁霉素后,蝴蝶兰的生长与对照相比明显旺盛,地上部和地下部的生物量都有所增加,根系的各项指标也有不同程度的加强。3.康宁霉素对蝴蝶兰灰霉病具有较好的防治效果,并建立了康宁霉素诱导蝴蝶兰抗灰霉病技术体系。测定了离体条件和盆栽条件下康宁霉素对蝴蝶兰的杀菌与抑菌效果,结果表明,康宁霉素的杀菌效果较嘧霉胺弱,但持效期比嘧霉胺长,抑菌效果比较明显。既可喷施也可灌施,杀菌时喷施效果好,抑菌时灌施效果好。构建了康宁霉素诱导蝴蝶兰抗灰霉病技术体系。康宁霉素诱导接种的最佳浓度为0.2mg/L;灌根诱导的相对防效较好;诱导接种和挑战接种间隔为1d和3d时,康宁霉素诱导抗性效果较好;诱导处理的生长发育越早,其诱导作用越显著。
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