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背景和目的：
谷氨酸(Glutamate，Glu)是人及哺乳动物中枢神经系统内兴奋性神经递质中最重要的氨基酸。过量的谷氨酸对神经元有损伤作用，即兴奋性毒(Excitotoxicity)。大量研究已证实多种神经系统疾病如缺血及缺氧性脑损伤、帕金森氏病、亨亭顿氏病、阿尔茨海默氏病、肌萎缩脊髓侧索硬化症等均与谷氨酸在神经系统内的堆积或过量释放有关。目前对这些神经系统疾病还没有令人满意的治疗药品。神经干细胞(neural stem cells，NSCs)是神经系统中能够增殖分化成神经元和神经胶质细胞的特定原始神经细胞，它具有高度的自我更新能力、低免疫源性、多潜能分化、迁移功能及良好的组织融合性等特性。虽然这类细胞终身存在，但由于绝对数量和局部微环境所限，损伤神经组织的自我修复作用微乎其微。采用外源性的神经干细胞移植已被认为是治疗神经系统疾病最具前景的治疗方法之一。
本文探讨神经干细胞经侧脑室及尾静脉注射修复成年小鼠谷氨酸神经损伤的可能性。
方法：
1．神经干细胞的分离及鉴定自孕15日的KM鼠取胚胎，取出胎鼠脑组织，胰蛋白酶消化成单细胞后，用Nestin免疫荧光法鉴定神经干细胞。
2．成年小鼠谷氨酸损伤模型谷氨酸单钠(4.0 g/kg)灌胃，连续10天。
3．神经干细胞的移植谷氨酸单钠灌胃结束后第1、10天，将Hoechst 33342标记的神经干细胞(10<6>/鼠)经侧脑室或尾静脉移植入小鼠体内，MSG组和Control组用DMEM代替。
4．免疫荧光染色神经干细胞先用Hoechst 33342标记，然后将其移植入小鼠体内，10天后牺牲小鼠，分离鼠脑，行脑组织冰冻切片，并进行Nestin免疫荧光染色，用DMIRB免疫荧光显微镜观察结果。
5．行为学实验用Y迷宫，爬绳及自主活动来检测实验组和对照组损伤后的神经功能恢复情况。
6．病理检查行为学结束后牺牲所有小鼠，小心分离出脑组织，10％福尔马林固定1周，石蜡包埋后，制成4μm厚的切片，并进行H.E染色。
结果：
1．神经干细胞的鉴定Nestin是神经干细胞的特异性抗原，我们采用免疫荧光技术来检测分离提取的细胞中Nestin的表达。结果显示，细胞被染成绿色，即Nestin表达阳性，提示分离得到的细胞是神经干细胞。
2．免疫荧光染色 NSCs移植10天后免疫荧光染色结果显示，小鼠胚胎神经干细胞移植入成体小鼠脑内呈区域特异性存活。
3．行为学实验MSG组小鼠的学习记忆能力和高空协调运动能力较Control组及MSG+NSCs组弱，而MSG+NSCs组小鼠的习记忆能力和高空协调运动能力均与Control组接近。
4．神经干细胞移植对MSG引起的组织损伤的影响实验结果显示，谷氨酸引起的海马损伤有神经细胞水肿，变性、坏死及细胞增生。然而，MSG+NSCs组小鼠脑海马区未发现神经元损伤。提示经侧脑室及尾静脉移植的NSCs能明显促进谷氨酸诱导的兴奋性损伤的修复。
结论：
本实验结果表明，神经干细胞侧脑室和尾静脉移植可以修复疾病或损伤的脑组织，特别是兴奋性脑组织损伤。