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目的:研究血链球菌细菌素(Streptococcus sanguis bacteriocin)作用于白色念珠菌(Candida albicans,C.albicans)后,白色念珠菌孢子相及菌丝相细胞膜上麦角固醇含量的变化。进一步探讨血链球菌细菌素对白色念珠菌的抑制作用机制。方法:1.将血链球菌标准株ATCC10556进行复苏传代,通过低温高速离心、超声波破碎、梯度盐析等方法提取血链球菌中对白色念珠菌有抑菌作用的胞内蛋白,即血链球菌细菌素。2.将白色念珠菌标准株ATCC10231进行复苏传代。将培养好的白色念珠菌放入葡萄糖-盐-生物素培养基(GSB)中,25℃,180rpm,振荡培养48h,得到静止期的孢子相白色念珠菌。对孢子进行出芽诱导,取孢子相菌体放入RPMI-1640培养基中,37℃,150 rpm振荡培养3h,得到白色念珠菌菌丝相。3.用磷酸盐缓冲液(1╳PBS)将血链素稀释至不同浓度,分别与白色念珠菌的孢子相及菌丝相菌悬液于37℃,150rpm恒温振荡培养12h,采用平板菌落计数法测定并观察血链素对白色念珠菌孢子相及菌丝相的最小抑菌浓度(MIC)。4.通过低温离心,分别提取血链素作用前后的白色念珠菌孢子相及菌丝相菌体细胞。采用醇碱溶液皂化有机相萃取的方法提取菌体细胞膜麦角固醇,紫外分光光度计测量血链素作用前后细胞膜麦角固醇的吸光度值(A),研究血链球菌细菌素对白色念珠菌细胞膜麦角固醇含量的影响。结果:1.血链球菌细菌素对白色念珠菌孢子相的最小抑菌浓度(MIC)为0.5g/L时,对菌丝相的MIC为0.25g/L。2.未加血链素时,白色念珠菌孢子相细胞膜麦角固醇含量为1.32±0.15%,菌丝相细胞膜麦角固醇含量为0.63±0.01%,二者具有显著差异(P<0.05);3.血链球菌细菌素与白色念珠菌混合培养:(1)12h后,白色念珠菌菌丝相细胞膜上麦角固醇含量明显降低,与空白对照组相比具有显著差异(P<0.05);(2)24h后,孢子相和菌丝相细胞膜上麦角固醇含量均显著降低,与空白对照组相比具有显著差异(P<0.05);(3)36h后,白色念珠菌菌丝相细胞膜上麦角固醇含量明显降低,与空白对照组相比具有显著差异(P<0.05);结论:1.血链素对白色念珠菌孢子相及菌丝相均有显著的抑制作用,对菌丝相的抑制作用效果强于孢子相;2.白色念珠菌菌丝相细胞膜上麦角固醇的含量高于孢子相细胞膜上麦角固醇含量(在本实验中菌丝相的含量约为孢子相的1倍);3.血链素可使白色念珠菌细胞膜上的麦角固醇含量降低,作用24h抑制作用效果最好,对菌丝相的作用效果强于孢子相。