鸡血藤为豆科植物密花豆Spatholobus suberectus Dunn.的藤茎,具补血、活血、通络的功效,临床上主要用于月经不调,痛经,经闭,风湿痹痛,麻木瘫痪,血虚萎黄。现代药理研究表明,鸡血藤对放、化疗引起的小鼠骨髓抑制有明显的缓解作用,临床上,鸡血藤广泛应用于放、化疗引起的白细胞减少症的治疗,效果显著。目的:本研究利用CTX致白细胞低下SD大鼠模型,考察鸡血藤水提物升高白细胞的药效学作用。在此基础上,以总黄酮为目标部位,利用大孔树脂吸附技术,对鸡血藤总黄酮进行分段富集,并配合CTX致白细胞低下SD大鼠模型筛选出升白有效部位,进一步对此部位进行化学成分研究,以期发现有效成分清晰,升白作用明显的有效部位,为鸡血藤的进一步开发利用提供科学依据。方法:1.鸡血藤水提取物对CTX致白细胞低下SD大鼠药效学研究SD大鼠CTX皮下注射(20mg/kg),连续6天给药,造白细胞低下模型。鸡血藤水提物24.3g生药/kg灌胃,观察对白细胞低下大鼠升白作用的影响。连续观察12天,分别在第2、4、6、8、10、12天采血测大鼠血常规,采用T检验对结果进行统计分析。2.鸡血藤总黄酮的富集研究分别选用AB-8、D101、HPD100、HPD400、HPD600五种型号大孔树脂,以最大静态吸附量和解吸率为指标,对鸡血藤总黄酮的目标部位进行筛选,优选出分离纯化鸡血藤总黄酮的最佳型号树脂,并进行洗脱曲线的考察。3.鸡血藤各部位对CTX致白细胞低下大鼠的影响将鸡血藤50%乙醇提取物,上优化得到的HPD 400大孔树脂柱,采用水—乙醇梯度洗脱,进行分段富集,得不同部位。配合SD大鼠CTX 一次性皮下注射(100mg/kg)造白细胞低下模型进行药效学筛选,观察I1天,分别在第4、7、9、11天采血测大鼠血常规,采用T检验对结果进行统计分析。4.鸡血藤升白有效部位D和鸡血藤正丁醇部位的化学成分研究对筛选出的鸡血藤升白有效部位(鸡血藤D),采用硅胶柱色谱、凝胶柱色谱、反相色谱等方法进行化学成分的的分离、纯化,运用1HNMR、12CNMR、MS进行化合物结构鉴定。结果:1.鸡血藤水提取物对CTX致白细胞低下SD大鼠升白细胞作用的影响与模型组相比,给药第十天开始,鸡血藤水提物A组当剂量为24.3g生药/kg时,有显著的升白作用(p<0.01),给药第十天模型组白细胞数为2.13×109/L,鸡血藤水提物白细胞数为3.43×109/L,具有显著性差异(p<0.01),给药第十二天模型组白细胞数为3.47×109/L,鸡血藤水提物白细胞数为7.86×109/L,具有显著性差异(p<0.01)。2.鸡血藤总黄酮的富集研究优选出最佳的富集鸡血藤总黄酮的树脂HPD-400,其最大静态吸附量为768.5mg/5g,解吸率为90.5%。由洗脱曲线可知,80%乙醇基本可以洗脱完全。3.鸡血藤各部位对CTX致白细胞低下大鼠的影响与模型组相比,鸡血藤D高组,当剂量为12.15 g生药/kg吋,给药第十一天时具有显著的升白作用,模型组白细胞数为4.64×109/L,鸡血藤D高组白细胞数为7.54 X 109/L(P<0.05),鸡血藤D组中剂量组4.05g生药/kg、低剂量组1.35g生药/kg,给药第十一天也具有明显的升白趋势,鸡血藤D组高、中、低剂量组升白作用呈明显的剂量依赖关系。4.鸡血藤升白有效部位D和鸡血藤正丁醇部位的化学成分研究从鸡血藤升高白细胞的有效部位D中分离得到5个化合物,结构鉴定出3.个,均为黄酮类成分,分别为表儿茶素、芒柄花苷、染料木苷,其中染料木苷为首次从鸡血藤中发现;鸡血藤正丁醇部位分离得到1个化合物,为羊红膻醇,为首次从本科植物中发现。结论:1.鸡血藤水提物对CTX致白细胞低下模型有显著的促进白细胞升高的作用(P<0.01)。2.鸡血藤升白有效部位D(500%乙醇提取物鸡血藤—HPD-400大孔树脂吸附,依次用水洗脱、25%乙醇洗脱、70%乙醇洗脱,收集70%乙醇洗脱部位所得)也具有明显的升白作用(P<0.05)。3.表儿茶素等黄酮类化合物可能为鸡血藤升高白细胞的有效成分,鸡血藤升白作用及其有效成分研究有良好的开发前景尚并有待于深入研究。