通过定点突变改变OsGBSS1酶活来精细调控稻米中直链淀粉含量

来源 :中国科学院大学 中国科学院上海生命科学研究院上海植物生理生态研究所 中国科学院上海生命科学研究院 上海植物生理生态研究所 | 被引量 : 0次 | 上传用户:lionschen2009
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水稻蜡质基因Waxy(Wx)编码的OsGBSS1蛋白负责胚乳中直链淀粉的合成。直链淀粉与稻米的外观和食用蒸煮品质直接相关。以往对于OsGBSS1的调节仅从转录和转录后水平进行操作,本研究对OSGBBS1中的八个氨基酸位点对其蛋白活性的影响进行了研究,通过对Wx编码区进行定点突变并转化无OsGBSS1蛋白编码的材料,在对未成熟种子中的OsGBSS1测定酶活和对成熟种子中的直链淀粉进行定量后,推导出这些氨基酸位点对OsGBSS1功能的贡献率。笔者通过OsGBSS1立体结构模拟及与已结晶的同源蛋白序列进行比对推导OsGBSS1重要功能氨基酸,从而选择突变位点。突变后的OsGBBS1蛋白的酶活测定以及纯合转基因植物中直链淀粉含量的测定结果表明,OsGBBS1不同位点的突变影响其淀粉结合能力或者ADPG结合能力,从而导致其蛋白功能不同程度的丧失。本研究揭示了OsGBSS1参与直链淀粉合成的结构基础,从而为进一步了解OsGBSS1的反应机理以及精细调控稻米中的直链淀粉含量提供了依据。
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