芝麻油,俗称“香油”,因香味醇厚、浓郁而出名,是我国传统的食用油之一。芝麻油不仅营养价值高、风味独特,而且维生素含量丰富,胆固醇含量较低,含有人体必需的不饱和脂肪酸和氨基酸以及铁、锌、铜等微量元素,有益于人们的身心健康,深受人们喜爱。近年来,随着广大人民生活质量的改善和提高,我国芝麻油的需求量不断上涨。但是,伴随着多样化的芝麻油生产工艺的出现,一些不法商家为谋取暴利而对芝麻油进行掺假,比如高价格芝麻油中掺入异种廉价植物油脂或者既掺入异种廉价植物油又掺入香油精等杂质,致使芝麻油的品质参差不齐,芝麻油质量安全问题令人堪忧。目前,对食用油进行品种鉴定及掺假检测的手段很多,而分子生物学技术是一种较为新颖的检测方法,该方法主要应用于三个研究方向:食用油中转基因成分检测、食用油掺假检测以及食用油原料的品种鉴定。然而,开展分子生物学研究的关键是食用油DNA提取。本文主要研究结果如下:1、结合几种常用DNA提取方法,对芝麻油DNA提取方法进行比较和分析,最终通过对油类DNA提取试剂盒法进行改进,建立了一种高效、简便、稳定的芝麻油DNA提取方法。由正交试验得出芝麻油DNA提取的最优条件为:油样用量4mL,去油液为4 mL氯仿;裂解液为2.5 mL 1.4mol/L NaCl;摇匀时间50 min;摇匀速度25 r/min。通过方差分析得出结论,摇匀速度对提取DNA浓度影响显著。2、采用EST-SSR分子标记结合PCR技术鉴别7种不同品种芝麻油的品种差异,实验结果表明,针对种子和叶片DNA,25对引物均能扩增出理想的条带,扩增效率为100%;而油脂DNA的有效扩增率为96%。油脂DNA与种子或叶片DNA扩增结果相同的引物有18对,占72%。说明这18对引物能够用于油脂DNA的EST-SSR分析。研究发现,RMAPD标记是RAPD与SSR的有点相互结合的分子标记,可以有效揭示多态性,因此,本研究将RMAPD分子标记与聚丙烯酰胺凝胶电泳检测方法相结合开展6个芝麻品种油间的品种鉴定工作,实验结果表明,在选取的8对RMAPD引物中,有4对引物RA1-HS61F、RA1-HS62F、RA1-HS62R、RA1-HS63R能够将6种芝麻品种区分开来,其中效果最好的是RA1-HS61F,它不仅能将不同产地来源的芝麻品种加以区分,也能将驻20号与驻19号、晋芝3号与汾芝2号区分开来。3、为建立快速高效的芝麻油掺假检测技术,以DNA为基础,通过qPCR技术定性定量分析芝麻油DNA。最终结果表明,芝麻S199引物具有良好的特异性;通过芝麻S199、油菜BnA136和大豆L109种属特异性引物,鉴定这3种植物油特定的Tm值的差异,效果显著。另外,本实验建立一种芝麻油绝对定量线性方程:Y=-3.139lg(x)+20.06,R2=0.998,E=1.08,以此计算芝麻油掺假量。q PCR相对定量检测发现,芝麻油中掺入大豆油时,芝麻油DNA含量越高则Cq值越小;而芝麻油储存时间越久,提取DNA的Cq值越大,即DNA含量越低;因此可以推断,芝麻油储存时间越短,芝麻油DNA含量越高。为保证实验结果的准确性,实验过程中需注意控制芝麻油储存时间。