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目的:栀子(Gardenia Fructus,GF)是我国常用的药食两用中药材,是大健康产业中的大宗中药材品种,但是现有的标准体系与市场的实际流通、道地品种评价等要求尚有一定的距离。研究确立与功效密切相关的药效标志物,是构建以“质量标志物”为核心的质量评价体系的核心,也是栀子产业亟待解决的科学问题。方法:根据栀子传统功效及药理作用特点,采用新型模式斑马鱼作为栀子三类主要活性的快速评价模型。利用3 dpf(days post fertilization,dpf)绿色荧光标记的肝脏荧光转基因斑马鱼Tg(L-FABP:EGFP)、3 dpf绿色荧光标记的嗜中性粒细胞转基因斑马鱼Tg(lyz:EGFP)、3 dpf野生AB型斑马鱼,分别建立斑马鱼肝损伤保护、抗炎、抗血栓快速评价模型。利用斑马鱼模型评价不同产地栀子的活性差异。对于活性差异最大的2批栀子样本,采用高效液相串联飞行时间质谱(HPLC-Q-TOF/MS)进行高分辨检测,利用R软件用来提取质谱原始数据,经过数据预处理后导入SIMCA-P软件进行代谢组学分析,甄别与三类活性相关的潜在差异代谢物。进而利用灰色关联度分析(GCA)进一步对这些差异代谢物进行活性关联,筛选出与活性密切相关的成分。利用斑马鱼模型再次对二次筛选到的成分进行活性验证,得到三类活性的药效标志物,最后结合质量标志物“五原则”,确定栀子的质量标志物。结果:1.利用斑马鱼肝损伤保护模型评价不同产地栀子样本,发现福建福鼎和江西九江产的栀子样品活性差异最大;利用HPLC-Q-TOF/MS发现2个产地10个批次栀子1056个共有成分离子;利用正交偏最小二乘法判别分析(OPLS-DA)鉴别出27个潜在肝保护活性成分;应用GCA进一步发现27个成分中有5个与肝保护活性高度相关,鉴定其中3个为京尼平-1-β-D-龙胆双糖苷、栀子苷和西红花苷-1;通过斑马鱼活性验证实验,发现栀子苷和西红花苷-1具有显著肝保护作用。2.利用斑马鱼炎症模型评价不同产地栀子样本,发现湖北蓟春和浙江磐安产的栀子样品活性差异最大;HPLC-Q-TOF/MS共发现出2个产地11个批次栀子926个共有成分离子;OPLS-DA鉴别出21个潜在抗炎活性成分变量;应用GCA进一步发现21个成分中有15个与抗炎活性高度相关,并鉴定得到京尼平-1-β-D-龙胆双糖苷、奎宁酸、栀子酮苷、D-葡萄糖醛酸、L-苹果酸、甘露醇、芦丁、绿原酸、山栀苷和D-葡糖二酸;通过斑马鱼活性验证实验,京尼平-1-β-D-龙胆双糖苷、奎宁酸、栀子酮、D-葡萄糖醛酸、L-苹果酸、甘露醇、芦丁、绿原酸具有显著的抗炎作用。3.利用斑马鱼血栓模型评价不同产地栀子样本,发现安徽霍山和湖北蓟春产的栀子样品活性差异最大;HPLC-Q-TOF/MS共发现2个产地7个批次栀子614个共有成分离子;OPLS-DA鉴别出19个潜在活性成分;应用GCA进一步发现19个成中有10个成分与抗血栓活性高度相关,并鉴定得到栀子苷、奎宁酸、柠檬酸和京尼平-1-β-D-龙胆双糖苷;通过斑马鱼活性验证实验,栀子苷、奎宁酸、柠檬酸具有显著的抗血栓作用。4.整合分析栀子的药效标志物及质量标志物“五原则”,初步确定了栀子苷、京尼平-1-β-D-龙胆双糖苷、栀子酮苷为栀子的质量标志物。结论:本研究在栀子化学成分组学检测及斑马鱼模型活性追踪的基础上,建立一个“组学判别-灰色关联-生物活性”的研究策略,实现了栀子特定药效标志物的快速辨识;并利用该策略成功发现和鉴定了栀子中肝保护、抗炎、抗血栓的主要药效标志物;在此基础上初步确立了评价栀子质量的质量标志物,为构建中药栀子的现代质量评价体系提供了科学依据。