岩黄连规范化种植及其药材质量评价研究

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岩黄连系罂粟科紫堇属多年生草本植物石生黄堇Corydalis saxicola Bunting的干燥全草,是黔、桂石灰岩地区名贵中药材,性凉味苦,具有清热解毒、利湿止痛、散瘀消肿等功能。I临床上用于治疗疮疖肿毒、急性黄疸型肝炎、肝硬化、肝癌等疾病,疗效显著。野生岩黄连主要分布于广西、贵州、云南、湖北、四川等省区,在广西主要分布于东兰、巴马、凤山等县。随着其制剂临床应用逐年增加,原料的需求量亦日益增大。而岩黄连原植物分布局限于石灰岩山区,属石山特有种,生境恶劣,自然繁殖率低,资源蕴藏量十分有限。多年来由于人们大量采挖和收购,导致野生资源濒于枯竭,为开发利用和保护岩黄连种质资源,保证岩黄连资源的可持续发展,我们在广西东兰县建立了岩黄连规范化种植基地,进行了岩黄连引种驯化、人工栽培试验,并且以《中药材生产质量管理规范》(试行)(GAP)为指导,对岩黄连的种质资源、生物学特性、育苗栽培、田间管理、采收加工等规范化种植中的关键技术进行了研究,并开展了岩黄连药材质量标准研究。在此基础上,制订了岩黄连药材的质量标准和规范化生产标准操作规程(SOP)。研究结果总结如下: 1岩黄连种植基地的选择及环境质量评价 从岩黄连栽培社会历史背景、种植地地理气候条件、土壤以及环境质量等多方面评价与选定种植地,避免随意引种栽培。调查发现,广西东兰是岩黄连传统主产区之一,积累了一定的栽培经验,该地区的气候条件和土壤都适宜岩黄连的生长。对种植地的大气、土壤和灌溉水质进行了检测,其大气、土壤和灌溉水质量均符合《中药材生产质量管理规范》中规定的标准。因此,本研究将种植地设于远离居民生活区、工业区和交通要道的东兰镇达文村。 2岩黄连栽培技术与病虫害防治 对岩黄连育苗技术、种植栽培、田间管理技术、病虫害防治等规范化种植过程中的关键技术进行了总结。首先,对岩黄连开展了种子育苗试验,摸索出了岩黄连播种育苗的理想方法,解决了大面积栽培中的种苗来源问题。试验表明,7~8月是岩黄连的适宜播种期。先播种育苗,再营养杯假植,然后移栽大田。病虫害的调查发现,岩黄连的病害主要有茎基腐病、灰霉病等,尤以茎基腐病危害最为严重。采取种植前土壤消毒、高垄栽培、适时通风控制土壤空气湿度、增施磷钾肥或生物菌肥等田间栽培管理技术进行农业综合防治;以预防为主,发病初期即喷施波尔多液,发现病株实时摘除,隔离菌源。以农业生态防治为主,结合化学防治,可有效预防和控制岩黄连病害的发生发展。 3岩黄连有效成分分析方法研究 针对与岩黄连主要药理作用相关的有效部位(总生物碱)和有效成分(脱氢卡维汀),分别建立了酸性染料比色法和高效液相色谱法定量分析质控方法,质量评价指标与药效密切相关,这对确保岩黄连药材质量至关重要。同时,对岩黄连药材中生物碱类成分还进行了色谱指纹图谱的初步研究。本研究建立的脱氢卡维汀HPLC定量分析、总生物碱含量分析以及HPLC指纹图谱等质量控制关键技术,可用于对岩黄连不同采收期、不同产地干燥加工方法、不同追肥处理等生产出的药材的质量评价研究,对制订岩黄连规范化种植标准操作规程、药材质量标准,确保岩黄连药材质量的稳定与可控,以及岩黄连的开发利用等,均具有十分重要的作用。 4岩黄连中生物碱的动态积累及器官分布研究 就岩黄连不同生长发育时期、不同采收部位、产地干燥加工方法等因素与其有效成分在生长发育季节积累变化、器官组织分布的相关性进行了研究,探讨其有效成分、有效部位等的动态变化趋势,为岩黄连栽培技术、适宜采收期的确定、综合利用等方案的合理制定提供科学依据,为科学地制订岩黄连规范化种植标准操作规程(SOP)以及岩黄连资源开发利用提供理论依据和实践指导。同时,还尝试应用色谱指纹图谱技术对不同采收期、不同器官组织部位、不同干燥方法岩黄连药材样品的化学成分进行分析研究。从岩黄连植物生长发育的角度,揭示了岩黄连主要有效成分脱氢卡维汀和总生物碱在植株中的积累分布规律,为科学地确定药材的合理采收期、入药部位提供了理论依据。 5施肥对岩黄连药材产量与质量影响的研究 施用不同种类的肥料对岩黄连总生物碱和脱氢卡维汀含量均有较大影响,且对总生物碱含量的影响更明显。总体来看,均衡N、P、K养分供应(施用复合肥)有利于促进岩黄连的生长,同时其有效成分含量亦相对较高。配施钾肥对岩黄连有效成分含量的影响呈负效应。 6岩黄连药材质量标准研究 在上述实验研究的基础上,对岩黄连药材水分、浸出物、灰分及酸不溶性灰分、重金属等检查项目进行了测定,并确定了限量标准。阿时以岩黄连中特征性成分脱氢卡维汀为对照品,建立了岩黄连药材薄层色谱定性鉴别方法,以及岩黄连药材中脱氢卡维汀和总生物碱的含量测定方法及含量范围标准,为保证岩黄连药材内在质量的可控性和均一性提供科学依据,将对岩黄连药材的质量控制起到积极的促进作用。 7岩黄连规范化生产标准操作规程 在对岩黄连的生物学特性和种植技术进行深入研究,对传统种植经验总结提高的基础上,制订了岩黄连规范化生产标准操作规程(SOP)。本SOP以保证药材内在质量为核心,对药材种植环境、栽培管理技术、采收加工方法等药材生产全过程进行了全面的规范,形成了完整的药材生产流程,对岩黄连种植生产具有重要的指导作用。
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