该文建立了聚丙烯酰胺凝胶电泳-增强化学发光成像检测蛋白质的方法,并研究了使用这一方法对人血清结合珠蛋白进行电泳检测,能够快速得到人血清结合珠蛋白亚型的信息.这一方法中的增强化学发光成像检测法是基于鲁米诺-过氧化氢的化学发光体系而建立的.使用过硫酸胺对鲁米诺-过氧化氢体系的化学发光信号进行增敏,使得这一体系的灵敏度和线性范围得到很大改善.常规的电泳检测方法要求电泳血清时加入一定量的血红蛋白才能对血清结合珠蛋白进行检测,而使用增强化学发光成像检测法能在不加入血红蛋白的情况下得到人血清结合珠蛋白的亚型结果.使用增强化学发光成像法检测纯血清的结果,在与直接化学发光成像法检测加入血红蛋白的血清结果进行比较时,发现在谱带数目和位置上均有差异.这表明,使用增强化学发光成像法,能够检测到血红蛋白含量较低时,人血清结合珠蛋白和血红蛋白的结合形式.而在人血清中,由于结合珠蛋白的存在,血红蛋白的含量是比较低的.所以使用这一方法,检测到的结果与人体血清中的存在形式更为接近,对于研究不同亚型的结合珠蛋白的血红蛋白结合能力能得出更加合理的结果.在加样量为15μL的情况下,该文检测到的结合珠蛋白的线性范围为0.1~13.3 μg/mL,检测限为1.21ng.这一方法与传统染色检测法相比,在速度上有很大改进,从6到8小时缩短到15分钟.在该论文的第二部分,研究了碳纳米管基质辅助作用在聚丙烯酰胺凝胶电泳分离人血清蛋白中的应用.在制聚丙烯酰胺凝胶的时候加入多壁碳纳米管,从而制得具有碳纳米管基质辅助作用的凝胶.我们以人血清中的apolipoprotein A-I蛋白和C3补体成分作为模型,研究了碳纳米管基质辅助的聚丙烯酰胺凝胶在分离蛋白质时的作用.发现在普通电泳的模式下,apolipoprotein A-I蛋白和C3补体成分的分离得到很大的改善,原本无法分离的这两种蛋白在碳纳米管基质辅助的作用下,能够被完全分离,分离的结果已经使用生物串连质谱加以证实.该文的研究中使用了Triton X-100来帮助碳纳米管分散到水相中,碳纳米管表面已经由疏水性变为部分亲水性.碳纳米管表面的这种同时具有部分亲水性的性质使得蛋白质在其表面被吸附程度不同,使得在电荷/质量比率很接近的apolipoproteinA-I蛋白和C3补体成分由于其亲水性的差异得到分离,这一方法在改善蛋白质分离的方面有很广阔的应用前景.该文开辟了碳纳米管在生物样品方面应用的新领域.