甲基对流磷共代谢降解菌的筛选及降解机制和降解性能的研究

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有机磷农药在植物病虫害防治中占据着不可替代的位置。但随着越来越多的有机磷农药广泛而大量的使用,有机磷农药直接或间接地危害着人畜健康和环境污染。植物的抗药性增强,浓度增大,农作物中农药的残留加大,环境污染加重,严重影响人畜健康。因此,降低农药使用浓度、降解植物表面、土壤及空间中残留农药的研究,日益受到关注。因此,研究甲基对硫磷的生物降解具有重大的意义。本文从长期使用农药土壤中筛出一株对甲基对硫磷降解能力较强的细菌,编号为JM-013。根据菌种形态和生理生化特性,初步鉴定为杆状细菌Clostridium butyricum。经对降解产物的紫外扫描分析,Clostridium butyricu通过产生胞内外分泌型酶降解甲基对硫磷为对硝基苯酚,经多代繁殖可保持遗传降解的稳定性和广谱性;在含有甲基对硫磷的培养基中加入谷氨酸,a-酮戊二酸,天冬氨酸,苹果酸,柠檬酸钠时,可提高JM-013菌株降解甲基对硫磷能力,其中柠檬酸钠作用降解率最高;根据共代谢效应试验,初步认为甲基对硫磷的降解与三羧酸循环有密切的关系。甲基对硫磷降解单因素实验表明,JM-013菌最佳培养条件:柠檬酸钠的含量1.3%,硝酸铵为0.08%,pH值7.5,35℃,200r/min,接种量为6%;其中碳源,氮源,培养温度以及接种量为主要影响因素。经正交试验,JM-013菌株降解甲基对硫磷的最佳组合为A2B3C3D1,即培养基中柠檬酸钠的含量为1.3%,接种量为7%,硝酸铵的含量为0.01%,培养温度为33℃。结合单因素试验和正交试验优化条件发酵,甲基对硫磷降解率可达62.56%。
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