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目的:溃疡性结肠炎(Ulcerative colitis,UC)属于炎症性肠病(inflammatory bowel diseases,IBD),是一种累及结直肠的慢性非特异性炎症性疾病。细胞焦亡是新近发现的一种与炎症相关的细胞程序性死亡,与感染性疾病、自身免疫性疾病有密切关系。在细胞焦亡过程中,成孔蛋白gasdermin D(GSDMD)起着关键作用。含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白酶1(Caspase-1)剪切GSDMD蛋白后,GSDMD的N端在细胞膜上形成细小的孔道,促进炎性细胞因子的释放,最终发生细胞焦亡。在前期实验研究中,本课题组对中药复方溃结灵作用于NF κ B通路和NLRP3炎性体进行了探讨,本实验在此基础上,从溃结灵对Caspase-1介导细胞焦亡的调节作用着手,探讨溃结灵对溃疡性结肠炎的作用靶点和机制。方法:将SPF级雄性大鼠按区组随机法进行分组,分别为正常组、模型组、溃结灵高剂量组、中剂量、低剂量组以及柳氮磺吡啶组。除正常组外,其余五组均使用2,4,6-三硝基苯磺酸(TNBS)灌肠造模复制溃疡性结肠炎大鼠模型,造模第3天,正常组和模型组正常喂养,其余各组分别给予药物连续干预10天,在实验过程观察大鼠的一般情况,记录体重变化,测量结肠长度和结肠重量,收集大鼠结肠粘膜,使用实时荧光定量-聚合酶链式反应PCR检测结肠粘膜白介素-1 β(IL-1 β)、白介素-18(IL-18)的基因表达,Western Blot检测结肠粘膜GSDMD、Caspase-1、IL-1 β、IL-18蛋白表达水平。结果:1、与正常组比较,模型组大鼠重量减轻(P=0.001),结肠短缩(P=0.000),结肠单位质量增加(P=0.002);给药组与模型组比较,溃结灵高剂量组、柳氮磺吡啶吡组大鼠体重上升明显(P=0.004,0.003),溃结灵高中剂量组及柳氮磺胺吡啶组结肠长度增长(P=0.030,0.024,0.023),溃结灵高中低剂量及柳氮磺吡啶组结肠单位质量明显减轻(P=0.007,0.012,0.012,0.017)。2、与正常组比较,模型组大鼠的IL-1 βmRNA表达升高明显(P=0.000);给药组与模型组比较,溃结灵高剂量组和柳氮磺吡啶组大鼠的IL-1 β mRNA表达降低(P=0.005,0.010)。与正常组比较,模型组大鼠的IL-18mRNA表达升高(P=0.016);给药组与模型组比较,溃结灵高剂量组和柳氮磺吡啶组大鼠的IL-18mmRNA表达降低(P=0.039,0.025)。3、与正常组比较,模型组大鼠的GSDMD蛋白表达升高明显(P=0.004);给药组与模型组比较,溃结灵高剂量组和柳氮磺吡啶组大鼠的GSDMD蛋白表达降低(P=0.016,0.025)。与正常组比较,模型组大鼠的Caspase-1蛋白表达升高明显(P=0.004);给药组与模型组比较,溃结灵高剂量组和柳氮磺吡啶组大鼠的Caspase-1蛋白表达降低(P=0.016,0.037)。与正常组比较,模型组大鼠的IL-1 β蛋白表达升高明显(P=0.001);给药组与模型组比较,溃结灵高中剂量组和柳氮磺吡啶组大鼠的IL-1 β蛋白表达降低(P=0.008,0.034,0.025)。与正常组比较,模型组大鼠的IL-18蛋白表达升高明显(P=0.000);给药组与模型组比较,溃结灵高剂量组和柳氮磺吡啶组大鼠的IL-18蛋白表达降低(P=0.007,0.012)。结论:综合实验结果分析,TNBS复制的UC大鼠的炎症发生可能与细胞焦亡有关。溃结灵对大鼠UC模型有治疗作用,其作用机制可能与其抑制Caspase-1的活化,进而抑制GSDMD的活化,减少细胞焦亡,降低IL-1 β和IL-18的生成和释放量有关。