论文部分内容阅读
丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)是生物体内重要的信号转导系统之一。p38MAPK属于MAPK的一个亚族,是广泛存在于细胞内的含有丝氨酸/苏氨酸残基的蛋白质激酶。它通过转录因子磷酸化而改变基因的表达水平,参与多种胞内信息传递过程,能对广泛的细胞外刺激发生反应,介导细胞生长、发育、分化及死亡全过程。
p38信号通路在调控细胞应激反应过程中的作用是无法代替的,在哺乳动物中已经有相当大量的研究来揭示其作用机理,而在果蝇中p38信号通路的作用还不太清楚。
本论文以KG05834original纯合雌蝇为切入点,参考前人研究发现KG05834original纯合雌蝇不育的现象,提出p38c不完全表达,而导致不育的猜想,并利用重组和基因敲除来验证猜想,重组后发现可育了,说明之前的猜想有偏差,但是并不能说明p38在这个过程中没有作用,为此我们首先通过组织解剖、DAPI染色、western blot等实验技术,对重组后的KG05834new进行了研究,结果发现KG05834new纯合雌蝇与野生型相比,卵巢变小,生殖能力下降,磷酸化水平降低;其次对p38a、p38b、p38a/c三株突变体进行了研究,结果发现当p38缺失时,卵巢的发育也受到了影响,生殖能力下降,在p38b突变体中,这种现象尤为显著;最后我们又回到我们KG05834original,检测纯合雌蝇体内磷酸化p38水平,发现其水平明显上调,解剖其卵巢后发现与野生型相比,卵巢明显变小,DAPI染色发现其卵巢发育停滞。通过以上的工作,我们分别从磷酸化p38(P-p38)水平降低、p38缺失、和磷酸化p38(P-p38)水平升高三个方面,采用多种生物化学和分子生物学实验技术,证明p38信号通路在果蝇雌性生殖系统中有着重要的作用,为以后系统研究p38信号通路在果蝇体内的作用提供了参考。