金铁锁(Psammosilene tunicoides W. C. Wu et C. Y. Wu)为石竹科金铁锁属植物,是我国西南苗族、彝族地区特有的药用植物。金铁锁主要以根入药,临床上常用于治疗类风湿性关节炎等疾病。金铁锁主要化学成分是三萜、三萜皂苷、环肽以及内酰胺。药理试验表明,金铁锁总皂苷镇痛和抗炎效果明显。近年来由于金铁锁的市场需求不断增加,野生植物资源数量急剧下降,已成为珍稀濒危物种。本研究以金铁锁为对象,建立了金铁锁总皂苷的含量测定方法,并从金铁锁总皂苷中分离出一个皂苷类单体；利用植物细胞培养技术建立了金铁锁愈伤组织和毛状根培养体系,并对金铁锁药材、愈伤组织、毛状根中的总皂苷含量进行了对比；对金铁锁药材和植物细胞培养产生的皂苷类成分进行了对比研究。这对于进一步优化植物细胞培养的条件和参数,构建高产细胞系,实现金铁锁植物细胞规模化培养生产毛状根替代金铁锁原植物入药具有重要指导意义。本研究以金铁锁植株幼嫩茎为外植体,诱导成功金铁锁愈伤组织,并建立了光照和暗培养条件下的金铁锁愈伤组织培养体系；利用发根农杆菌ACCC10060诱导金铁锁无菌苗产生毛状根,筛选出具有自主生长且抗卡那霉素特性的转化毛状根,建立了金铁锁毛状根培养体系；观察研究植物组织生长状况,明确了愈伤组织和毛状根的生长周期。本研究采用紫外分光光度法建立了金铁锁总皂苷的含量测定方法,测定结果显示：金铁锁药材,愈伤组织1,愈伤组织2和毛状根中总皂苷的含量分别为0.217%,0.388%,0.221%和0.857%,总皂苷含量的大小顺序为：金铁锁毛状根>金铁锁愈伤组织1>金铁锁愈伤组织2>金铁锁药材。特别是金铁锁毛状根中总皂苷的含量是金铁锁药材中总皂苷含量的近4倍。本研究采用高效液相色谱法对金铁锁药材和植物细胞培养产生的皂苷类成分的种类和含量进行了对比分析,结果显示：金铁锁药材、愈伤组织1、愈伤组织2、毛状根皂苷色谱图中均出现三个保留时间相同而且吸收较强的峰,因此可以判断出金铁锁药材和植物细胞培养产生的总皂苷均含有这三类成分,而且成分含量较高。对比分析峰面积,可以看出,在不同植物组织中,每类成分含量大小顺序均为金铁锁毛状根>金铁锁愈伤组织1>金铁锁愈伤组织2>金铁锁药材；在同一植物组织中,三类成分含量大小顺序均为A>C>B。研究结果表明：利用植物细胞培养技术生产金铁锁毛状根是促进金铁锁可持续利用的有效方式,有着较好的研究和应用价值。