青海棘球绦虫mtDNA COI和NDI基因多态性分析

来源 :青海大学 | 被引量 : 2次 | 上传用户:qinchuanhedian
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为进一步掌握青海省流行的棘球绦虫线粒体DNACOI基因和NDI基因的遗传差异性,明确棘球绦虫在青海省主要终末宿主的感染流行状况。本文以采集的棘球绦虫(Echinococcus)成虫为研究对象,分别PCR扩增棘球绦虫线粒体DNA COI基因片段和NDI基因片段,直接测序进行基因多态性分析,旨在获取相应的遗传学差异信息。本研究在青海省共搜集得感染野生狐狸和藏犬的棘球绦虫分离株22株,经PCR扩增和DNA测序,从22个棘球绦虫分离株中均扩增获得363bp的mtDNACOI基因片段。该基因片段的聚类分析表明,在22个棘球绦虫分离株中,10株分离株为细粒棘球绦虫G1型(Echinococcus granulosus I, E.granulosus G1),8株为多房棘球绦虫(Echinococcus multilocularis, E.m),4株为石渠棘球绦虫(Echinococcus shiquicus, E.s)。10株多房棘球绦虫株间同源性为99.2%~100%;8株多房棘球绦虫株间同源性为98.7%~100%;4株石渠棘球绦虫株间同源性为99.2%~99.8%。E.granulosus G1型与E.m型株间同源性为86.8%~89.2%,E.granulosus G1型与E.s型株间同源性为88.3%~89.5%,E.s型与E.m型株间同源性为88.1%~90.1%。E.granulosus G1型有6个不同的核苷酸序列,发现5个位点核苷酸发生碱基置换,约占分析位点总数的1.38%,基因序列间差异值在0%~0.8%之间;E.m型,有4个不同的基因序列,发现5个位点核苷酸发生碱基置换,约占分析位点总数的1.38%,基因序列间列差异值在0%~1.3%之间;E.s型,有4个不同的基因序列,存在的6个核苷酸序列碱基置换位点,约占分析位点总数的1.65%,基因序列间列差异值在0.2%~0.8%之间。种内变异率小于1.3%,种间变异率大于9.9%。经PCR扩增和DNA测序,从22个棘球绦虫分离株中扩增获得507bp的mtDNA NDI基因片段。该基因片段序列的聚类分析,与COI基因片段的聚类分析获得了一致的结果。E.granulosus G1型,有5个不同的核苷酸序列,发现10个碱基置换位点,约占分析位点总数的1.97%,基因序列间差异值在0%~1.0%之间;E.multilocularis型,存在4个不同的基因序列,共8个碱基置换位点,约占分析位点总数的1.58%,序列间差异值在0%~0.7%之间;E.shiquicus型,存在4个不同的基因序列,共有12个碱基置换位点,约占分析位点总数的2.37%,序列间差异值在0.2~1.18%之间。种内变异率小于1.0%,种间变异率大于15.6%。
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