生物材料@金纳米棒作为抗肿瘤药物载体的研究

来源 :郑州大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:zhaobaodong2006
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目的:制备生物材料修饰的金纳米棒-DNA(GNRs-DNA)纳米载体给药系统,负载一线抗癌药物盐酸阿霉素,协同金纳米棒热疗与抗癌药物化疗的作用,体内外评价这种纳米载体治疗肿瘤方面的作用。  方法:采用简便的种子生长法制备均匀分散的金纳米棒溶液,大肠杆菌转化法提取并酶切得到M13mp18 RF I DNA材料;通过金-硫键将稳定材料聚乙二醇(PEG)和靶向材料多肽(RLT)修饰于GNRs-DNA,构建出PEG&RLT修饰的GNRs-DNA纳米载体给药系统;琼脂糖凝胶电泳测定DNA条带;激光纳米粒度仪测定电位值;透射电镜扫描载体的形态;紫外分光光度法评价载体特征;超滤离心法测定RLT结合率和载体包封率;MTT法考察给药系统对MCF-7和PC3的细胞抑制率;荧光显微镜和激光共聚焦显微镜进行细胞摄取定性分析;流式细胞仪对 PC3细胞进行摄取定量、细胞周期、细胞凋亡和细胞活性氧分析;采用活体成像仪考察载体在PC3肿瘤模型裸鼠的体内分布情况。  结果:优化制备工艺制得长径比4,形态均一的金纳米棒和浓度为2.57ug/ul的M13mp18 RF I DNA。成功构建出GNRs-DNA-PEG、GNRs-DNA-PEG-RLT载体,并将 DOX负载于载体内,包封率分别为79.73%、67.98%,释药缓慢,血清中比较稳定,未见载体材料聚集,说明可供注射使用。细胞实验结果显示纳米载体无细胞毒性,且能被肿瘤细胞摄取进入细胞。DOX/GNRs-DNA-PEG、DOX/GNRs-DNA-PEG-RLT、各协同激光照射组与游离盐酸DOX相比,细胞凋亡率均增加;将癌细胞阻滞在细胞周期的 S期,产生活性氧的能力也增强。动物实验结果显示,RLT表现出较好的靶向能力,能够增加药物在肿瘤组织的滞留时间,并在其他组织无明显分布。  结论:本实验利用所构建的PEG&RLT修饰的GNRs-DNA纳米载体给药系统来传递DOX能够实现热疗和化疗相结合的治疗手段,产生较好的抗肿瘤效果,为肿瘤的治疗提供了新的方法。
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