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实验首先研究了膨胀床的基本流体力学性能,考察了流速u、沉降床高度H0和料液粘度μ对轴向分散系数Dax、理论塔板数N、以及Peclet数的影响。利用RTD(平均停留时间分布)测定的方法,求出不同u、H0和μ下,Dax、N以及Peclet数。其次考察了利用膨胀床内的离子交换层析技术初步纯化人血红素加氧酶-1。通常分离纯化HO酶,在进行柱层析之前需要经过超声破碎、超速离心、盐析、超滤等一系列预处理步骤,去除料液中的细胞碎片及其它杂蛋白成分,但过多的操作步骤会造成酶回收率和酶活的下降。
膨胀床操作流速范围在100~300cm/h,处理速度较快。膨胀床的层析介质在使用后,通常用1MNaCl、0.5MNaOH洗涤即可恢复吸附性能,能够在多次分离中循环使用。洗涤的时间和强度可视加工料液所含蛋白的种类和浓度而定。此外,膨胀床吸附具有规模放大的潜力,可以处理大体积的发酵液,所以本研究为HO-1的大规模制备提供了一种可行性方案。