功能化磁性微球的合成及在血红蛋白分离中的应用研究

来源 :北京化工大学 | 被引量 : 1次 | 上传用户:bianhao9527
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众所周知,蛋白质组学的进步主要取决于大规模高通量蛋白质分离和分析方法的革新和进步。近年来,研究者们设计合成不同类型的功能化磁性微球,表面功能基团通过静电吸附或亲和作用可以识别或可逆结合蛋白质中的目标位点来实现蛋白质的分离。本论文采用交联法和蒸馏沉淀聚合法合成了两种表面功能化的磁性微球,并成功将其应用于血红蛋白的分离。1、首先通过改进的溶剂热法合成Fe3O4磁性微球,其次通过溶胶凝胶法合成具有核壳式结构的Fe304@Si02,然后通过硅烷化反应将3-氨基丙基三乙氧基硅烷(APTES)修饰到Fe304@Si02表面,使其表面含有丰富的氨基官能团。最后,通过交联反应,以戊二醛为交联剂,将2-氨基噻唑键合到3-氨基丙基修饰的磁性微球表面上,合成噻唑功能化磁性微球Fe3O4@SiO2@AT。针对其进行高丰度蛋白血红蛋白的分离性能研究,实验结果表明其具有较高血红蛋白负载量、优异的选择性分离血红蛋白的性能。2、分别通过改进的溶剂热法和溶胶凝胶法合成Fe3O4和Fe304@Si02,进一步硅烷化反应将γ-(甲基丙烯酰氧)丙基三甲氧基硅烷(MPS)修饰到Fe304@Si02表面,使其表面含有丰富的双键官能团,然后通过表面的双键与单体氯甲基苯乙烯发生蒸馏沉淀聚合反应,在磁性微球表面修饰上一层聚氯甲基。表面修饰的氯甲基和N-甲基咪唑反应,形成甲基咪唑基离子液体,合成咪唑阳离子功能化磁性微球Fe304@Si02@pVBC@IL。进行蛋白质等温吸附、选择性吸附和吸附动力学研究实验,并将其应用于人全血实际样品中血红蛋白的分离。结果表明此功能化磁性微球展现出很高的血红蛋白吸附容量、较好的选择性和蛋白质吸附可以快速达到平衡,能够很好的从复杂的实际生物样品中分离出血红蛋白。
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