实验动物遗传背景均一，用于实验重复性好，可比性强，正是用于食用或观赏的鱼类所欠缺的，因此实验动物的重要性越来越被人们所认识，对实验动物的研究也越来越多。实验动物用于评价免疫因子方面的研究也逐年增加。　　 IgM存在于鱼的血清和其他分泌物中，包括皮肤和肠道粘液。不同种类的硬骨鱼之间有不同的IgM的抗体反应和血清浓度。鲑鱼对许多抗原都有很高的反应，产生与之相关的大量的特异性抗体，但这些反应都是由某些抗原表位调控。相反，大西洋鳕鱼的一个特性是在半抗原疫苗或全菌疫苗免疫后其抗体水平完全没有或只有微弱的提高，但是其免疫效果却较高。因此从基因水平研究IgM的表达水平逐渐受到重视。在低等脊椎动物如鱼类，因为其特异性免疫系统不如高等脊椎动物那样完善，因此非特异性的补体系统就占据了非常重要的地位。所以检测非特异性指标也是评价疫苗效果的重要内容。　　 珠江水产研究所研究的剑尾鱼品系RR-B系已经具有较高的遗传纯度，符合作为水生实验动物的纯度要求。因此本论文以剑尾鱼作为研究对象，以嗜水气单胞菌疫苗作为抗原，注射免疫后，应用荧光定量PCR技术探讨IgMmRNA在主要免疫器官脾脏、头肾组织中表达水平的差异。因为剑尾鱼血清很少，不足以用来检测；而之前很多文献都是以ELISA检测鱼类血清中的IgM抗体，所以为了研究IgM在基因和蛋白水平表达的关系，本论文还以鲫鱼(Carassiusauratus)作为研究对象，也以嗜水气单胞菌疫苗作为抗原，注射免疫后，应用荧光定量PCR技术探讨IgMmRNA在主要免疫器官脾脏、头肾组织中表达水平的差异，用ELISA测定血清中抗体滴度变化，从基因表达和抗体产生水平上检测注射免疫产生的应答效果。最后以剑尾鱼(Xiphophorushelleri)作为新的研究对象，同样注射免疫嗜水气单胞菌疫苗，荧光定量PCR技术探讨非特异性免疫因子(补体C1、C3、C9)的消长规律。　　 1、鲫鱼注射嗜水气单胞菌灭活疫苗后IgM在基因和抗体水平的表达鲫鱼注射嗜水气单胞菌疫苗后，定量PCR检测脾脏和头肾中IgMmRNA的转录变化；同时用ELISA测定血清中抗体滴度变化。于免疫后定期取样，结果表明：脾脏和头肾组织中均检测到IgM基因表达上调，并且随时间呈先升高后降低的趋势。IgM在脾脏中有较大表达量（一免的高峰值在第4d，为18.91；二免的最高峰是在第12d，为27.54），而头肾中的表达量较小（一免的高峰值在第4d，为6.10；二免的最高峰是在第12d，为16.47）。而抗体滴度的峰值是在第22d，效价为3200。比较鲫鱼血清的抗体与组织中基因的消长规律，发现组织中基因表达的峰值出现时间较早（第12天），上调持续时间较短(22d)。而抗体的出现滴度最高峰与基因表达的最高峰相差一周左右，符合鱼类Ig产生的基本过程。　　 2、剑尾鱼注射嗜水气单胞菌灭活疫苗后IgMmRNA的表达终浓度为108CFU/mL的嗜水气单胞菌全菌疫苗注射免疫剑尾鱼后，应用荧光定量PCR方法，研究免疫球蛋白IgM对嗜水气单胞菌疫苗产生免疫应答的作用效果以及消长规律。结果表明，免疫后的剑尾鱼IgM在脾脏和头肾中都是在第4d到达高峰，分别为11.31和5.60。　　 3、剑尾鱼注射嗜水气单胞菌灭活疫苗后补体C1、C3、C9基因的表达浓度为108CFU/mL的嗜水气单胞菌全菌疫苗注射免疫剑尾鱼后，应用荧光定量PCR方法，研究三种补体成分C1、C3、C9对嗜水气单胞菌疫苗产生免疫应答的作用效果以及它们的消长规律。结果表明，免疫后的剑尾鱼C1在脾脏、头肾中表达较低，与对照组相比变化不明显。而C3、C9的表达水平显著提高，C3、C9这两个基因的表达似乎与合成的组织相关。在脾脏中，C3、C9的表达呈现一定的相似性，都是在第2d达到最高峰，分别为16.32和10.82，而对照组在第6d也都有一个小峰值(27.77、2.59)。在头肾中，C3、C9的表达也呈现一定的相似性。免疫组都是在第4d达到最高峰，分别为350.64和988.66；对照组在第7d也有一个峰值(363.31、448.61)。　　 综上所述，比较鲫鱼IgM在基因和抗体水平的表达，发现基因表达要比抗体出现的时间要早，两者相差一周左右。而剑尾鱼，它对嗜水气单胞菌疫苗的免疫有较高的应答效果，IgM在脾脏和头肾中出现高峰的时间跟鲫鱼的相似，表明了剑尾鱼和鲫鱼对嗜水气单胞菌疫苗有一定相似的免疫反应，显示考虑剑尾鱼作为免疫评价模式生物的可行性。此外，非特异性免疫因子（补体C1、C3、C9）的消长规律也反映了剑尾鱼的免疫特性。除C1外，C3、C9在免疫后，它们的表达量都显著提高，尤其是C3、C9，特别敏感。C3、C9对照组都有峰值出现，推测这两者对外界刺激灵敏，也证明了剑尾鱼补体途径的识别范围和活化效率较高。