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随着抗生素和化学抗菌剂的开发及其临床上的滥用,大肠杆菌的耐药性变得日趋严重,多数抗菌药物正濒临被淘汰的境地。对于喹诺酮类药物,大肠杆菌对其耐药性问题已是国内外的研究热点。近些年出现了一类可以使耐药性进行水平传播的机制,即质粒介导的喹诺酮耐药(plasmid-mediated-quinolone-resistance,PMQR).因此对大肠杆菌的耐药性进行监测,以及PMQR耐药基因分子机制的调查研究,不仅能够指导临床上的合理用药,而且为开发新的药物具有重要的意义。从2006年～2011年不同地区不同动物源的采集样品中分离鉴定出530株大肠杆菌。对采集分离的大肠杆菌采用微量稀释法,进行22种抗菌药物的MIC值测定。测定结果显示,除头孢噻呋、阿米卡星、四环素和左氧氟沙星外,分离菌株的耐药率在时间上均高于55%，尤其喹诺酮类药物。鸡源性分离菌株耐药率高于猪源性及鸭源性分离菌株。各地区耐药情况有差异,但均呈现出高水平耐药。多重耐药菌株的比例为99.8%,以19耐、20耐、21耐多重耐药性为主。采用多聚酶链反应(PCR)法及直接测序法检测大肠杆菌菌株中PMQR(qnr,aac(6’)-Ib-cr，qepA)基因分布情况。结果显示,530株分离菌株中未检测出qnrC基因，qnrA基因检出率5.28％(28/530),qnrB基因检出率2.83％(15/530),qnrS基因检出率5.85％(31/530),qnrD基因检出率0.38%(2/530),aac(6’)-Ib基因变异率为100%，aac(6’)-Ib-cr基因检出率14.72%(78/530)，qepA基因检出率6.04%(32/530)。各耐药基因的PCR鉴定结果与耐药表型基本一致。应用微量玻片凝集试验对105株PMQR阳性菌做O抗原血清型鉴定,鉴定出67.62%(71/105)分离菌株分属于18种血清型,其中以060、O89、0119、0141、09、0107、0131、0137为优势血清型。采用接合转移试验研究耐药基因在菌株间的水平传播机制。结果显示,质粒接合转移率60.95%(64/105),表明PMQR基因可以在体外进行水平传播。与受体菌J53相比，接合转移子对抗菌药物的耐药率升高,尤其喹诺酮类药物。综上所述,通过对530株大肠杆菌的耐药性发现,分离菌株对22种抗菌药物的耐药性十分严重，普遍存在多重耐药现象。经PCR扩增检测出qnrA、qnrB. qnrS、qnrD、aac(6’)-Ib-cr及qepA基因,与耐药表型存在一定相关性。接合转移试验证明,质粒携带PMQR基因可以在不同菌间进行水平传播。