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第一部分骨髓来源抑制性细胞在实验性自身免疫性心肌炎小鼠中的表达规律目的探究骨髓来源抑制性细胞（Myeloid-derived suppressor cells,MDSCs）在实验性自身免疫性心肌炎（Experimental autoimmune myocarditis,EAM）小鼠中的表达规律。方法通过皮下注射小鼠心肌蛋白重链α（Cardiacα-myosin heavy chain,My HC-α）乳化剂二次免疫Balb/c雄性小鼠,构建实验性自身免疫性心肌炎模型。检测小鼠外周血、脾脏、骨髓、淋巴结和心脏中MDSCs细胞比例,同步对小鼠进行心脏伊红-苏木素（H&E）染色,结合脾脏MDSCs细胞比例和相应小鼠心肌炎临床评分进行相关性研究。结果实验组小鼠心脏切片HE染色结果显示,皮下免疫第10天心肌细胞开始出现肿胀坏死,血管和心包周围伴随炎性细胞浸润,在第14天炎症进一步加重,少部分心肌出现纤维化,于第18-21天达到顶峰,于第21天炎症开始减轻,合并心肌纤维化加重。MDSCs细胞比例在骨髓和脾脏中达到高峰时间分别为第14天和第21天。相关性分析显示,脾脏MDSCs细胞比例和心肌炎临床评分呈正相关。结论本实验提示MDSCs在心肌炎过程中由骨髓释放入血,转移至炎症灶心脏和二级淋巴组织脾脏和淋巴结,从而印证了MDSCs密切参与实验性自身免疫性心肌炎的发生发展。第二部分MDSCs调节心肌炎小鼠中Th17/Tregs平衡目的初步研究显示MDSCs密切地参与了EAM的发生发展,我们通过不同的MDSCs调控方式来观察MDSCs对疾病的发生发展的调控作用以及体内Th17/Tregs比例变化,来探索其在实验性自身免疫性心肌炎中的免疫调控作用。方法在实验性自身免疫性心肌炎模型的基础上,采用过继传输磁珠分选的MDSCs和腹腔注射吉西他滨来增加或者阻断MDSCs数量,流式检测脾脏中Th17细胞和Tregs的细胞比例,同步观察心脏HE切片染色中炎性细胞浸润状态,并通过实时定量聚合酶链反应（real-time quantitative polymerase chain reaction,RT-q PCR）试验检测炎症因子在脾脏组织中的表达。结果MDSCs流式检测结果印证MDSCs数量调控成功。在心肌炎初期（即免疫后第0天和第7天）过继传输MDSCs或者阻断MDSCs,均可降低Th17细胞比例并减轻小鼠心脏炎症细胞浸润程度;但单向过继MDSCs可提高Tregs细胞比例,而阻断MDSCs对Tregs的细胞比例并无显著作用。相应地,脾脏中除了IL-1β相对实验组没有明显变化,TNF-α、IL-10和TGF-β均出现明显降低。通过吉西他滨阻断实验组小鼠体内MDSCs后过继传输磁珠纯化的MDSCs,发现小鼠Th17细胞比例明显抬高合并心肌炎临床评分出现调高,而Tregs细胞比例无明显变化。脾脏中IL-10在过继传输前后表达出现差异。结论MDSCs在心肌炎中的作用具有双向性,在体内高水平炎症状态下MDSCs对心脏具有一定的保护作用,但在机体处于低水平炎症状态下MDSCs又具有一定的致病性,而这些一定程度上可能是依靠调节Th17/Tregs平衡达到的。第三部分MDSCs调节T细胞的增殖和分化目的通过上述实验了解MDSCs调节EAM的发生发展并可能参与机体Th17/Tregs比例变化,为了进一步探究MDSCs与T细胞的相关关系,我们通过共培养观察T细胞的增殖和分化功能,并初步研究MDSCs调节T细胞免疫应答的相关机制。方法将磁珠纯化后的MDSCs与脾脏单个核细胞按不同的细胞比例（0:1,1:8,1:4,1:2,1:1,2:1）共培养,检测T细胞增殖能力;通过阻断Arg-1和i NOS来检测MDSCs的抑制增殖的功能机制。在1:4的细胞比例下,我们来检测其中Th17细胞和Tregs的细胞比例,并通过酶联免疫吸附试验（Enzyme-linked immuno sorbent assay,ELISA）检测上清中IFN-γ,IL-1β,IL-6,IL-10和TGF-β的表达。为了进一步研究MDSCs对T细胞分化的影响,在Th17细胞或者Tregs诱导条件下,保持相同的1:4细胞比例共培养,观测淋巴细胞中T细胞的细胞分化。结果随着MDSCs比例的初步增高,T细胞增殖功能的抑制比例在1:4比例的情况下达到最大,但是进一步加大MDSCs细胞比例,T细胞的增殖功能又可逐步恢复;在MDSCs与单个核细胞比例1:4的情况下,阻断Arg-1可部分减轻其抑制功能。观察1:4细胞比例下T细胞中Th17细胞和Tregs细胞比例均出现调高,合并上清中IFN-γ,IL-1β,IL-6和IL-10的表达水平升高。然而,在Th17和Tregs的诱导条件下发现MDSCs诱导Th17细胞的分化而抑制Tregs中Foxp3的表达。结论MDSCs对T细胞增殖的抑制作用具有双向性,且抑制功能部分依赖于Arg-1;且相较于诱导Tregs,MDSCs可能更倾向于促进Th17细胞的分化。