赤霉素调控板栗不完全混合花芽向雌花的转化机理

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板栗(Castanea mollisima Blume)是重要的木本粮食植物,在我国广泛种植。植物分化基因在植物的开花结果、生长习性和株高等影响植物的产量。植物的开花不仅受到外部环境温度和光照的影响,其内源激素在开花过程中起到重要的调节作用。赤霉素是植物生长发育重要的调节激素,参与植物的植物的生长发育、开花、结果和生物与非生物胁迫的生物过程。赤霉素在植物开花过程中的分子机制和基因互作关系,调节植物的生长发育,从而调节植物的花发育过程。板栗花的性别分化调控研究,其在雌雄花分化过程中在基因水平上的差异分析研究,有效平衡雌雄比例是提高产量的重要突破口。本研究通过对临界期前后板栗两种混合花芽的转录组学有参分析,初步揭示了临界期前后板栗混合花芽分化过程中赤霉素相关基因表达差异,克隆关键基因进行分析,基于转录组数据分析了赤霉素相关差异基因的在不同时间空间上进行分析。研究结论如下:1.通过转录组数据的筛选,在板栗混合芽在萌发阶段和休眠阶段中赤霉素调控途径的差异,在不同组别的对比中,赤霉素相关途径的基因可能参与植物的休眠和萌发,因此并对该途径中其中6个基因进行荧光定量验证,结果与转录组数据表达趋势基本一致。2通过克隆克隆了CmGAI基因完整的读码框,构建PBI121-EGFP-CmGAI,进行烟草转化,对烟草转化后的进行蛋白质的提取后,并进行western blot实验进行检测。3通过克隆克隆了CmRGL2基因完整的读码框,构建PBI121-EGFP-CmGAI,进行烟草转化,对烟草转化后的进行蛋白质的提取后,并进行western blot实验进行检测。4基于转录组数据分析了板栗两种不同混合芽在休眠期前后的转录水平上的差异,通过蛋白数据库的对比后,筛选了与赤霉素相关的基因,从分子水平上解释板栗CmDELLA蛋白在赤霉素信号转导中受基因调控的关系。在赤霉素的调控中,CmGID2抑制CmDELLA基因的表达,同时受到生长素信号和F-box调控。在赤霉素的CmGAI和CmRGL2的基因在功能上存在一定的差异,该蛋白与泛素化蛋白SKP1存在着相互作用,与蛋白质的E3泛素化调节作用在一定程度上是相似的。可能是不同的生长阶段,CmDELLA基因不同类的基因的丰度是不同的,可能在蛋白功能上存在一定的差异。
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