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目的如何更快地修复骨缺损,一直是医学研究的热点。一方面,随着1990年后期RNA干预(RNA interference,RNAi)作用的发现,人们发现小干扰RNA(small interfering RNA,siRNA)能够特异性诱导序列基因沉默,小干扰RNA促进成骨得以广泛应用。另一方面,成骨材料层出不穷,胶原/生物活性玻璃复合材料具有生物活性玻璃优良的成骨活性和胶原优良的生物学性能而备受瞩目。基于这些实验结果,本研究拟结合si RNA和胶原/生物活性玻璃在成骨方面的作用,设计出负载siRNA胶原/生物活性玻璃复合材料,从而实现胶原/生物活性玻璃材料与si RNA协同增效促进成骨。方法通过聚乙烯亚胺(polyethyleneimine,PEI)包裹siRNA,利用q-PCR法筛选干扰效果良好的si RNA noggin。通过冷冻干燥法制备负载siRNA胶原/生物玻璃复合材料,检测支架材料表征、机械性能、溶胀速率、降解速率及siRNA释放速率。用SEM、共聚焦显微镜观察MC3T3-E1细胞在支架材料上的粘附和生长情况。用CCK8试验检测支架材料浸提液对细胞增殖的影响。培养14 d,通过ALP活性检测、q-PCR检测、茜素红染色评估支架对MC3T3细胞矿化的影响。结果利用PCR法筛选干扰效果达70%的siRNA noggin,通过冷冻干燥法制备负载si RNA胶原/生物玻璃复合材料观察为白色海绵状材料,生物活性玻璃均匀分散在胶原材料中,抗压强度较低,孔隙率适宜。第一周时,支架溶胀率达12.9%,降解率达30.7%,支架中siRNA随着材料降解而释放。细胞在支架上形成伪足,紧密黏附材料表面,细胞之间连接紧密。材料浸提液共培养MC3T3-E1 3 d、5 d后,负载si RNA胶原/生物玻璃支架组细胞增殖数目明显高于空白组,差异具有统计学意义。从支架中释放siRNA noggin干扰效率16%,siRNA在支架中仍保持一定活性。培养14 d后,负载siRNA胶原/生物玻璃支架组ALP、Runx2、BSP表达量高于单纯支架组,差异具有统计学意义。茜素红染色结果表明负载siRNA胶原/生物玻璃支架组较其余组有更多矿化结节形成,差异具有统计学意义。结论通过冷冻干燥法制备的负载siRNA胶原/生物玻璃复合材料,随着支架降解si RNA释放,siRNA noggin在支架中保持一定活性,支架具有良好的生物相容性,胶原/生物玻璃复合材料和si RNA noggin可协同增效促进成骨。