丽蝇蛹集金小蜂卵巢发育与卵黄发生的时间动态

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昆虫卵黄发生及其内分泌调控一直是昆虫生殖生理的研究核心之一,至今已就10个目60余种昆虫不同程度开展地了这方面的研究.但是,就膜翅目昆虫而言研究较少,关于膜翅目的寄生蜂则更少,且对寄生蜂是否拥有卵黄蛋白存有争议.迄今为止,就外寄生蜂是否拥有卵黄蛋白尚乏任何研究.为此,该论文就蝇类蛹期外寄生蜂—丽蝇蛹集金小蜂Nasoniavitripennis(膜翅目:金小蜂科),卵巢发育、卵子发生,卵黄蛋白的分子特性,及卵黄原蛋白的合成、卵巢对卵黄原蛋白的摄取及卵子内卵黄磷蛋白的降解动态作了研究,结果如下:丽蝇蛹集金小蜂卵巢83%由4对卵巢管组成,17%由3对卵巢管组成.同一根卵巢管中的卵子可分为三级,即1级卵(无卵黄)、2级卵(含有部分卵黄)和3级卵(充满卵黄).卵巢管从寄生后第10天开始出现(此时,卵巢管是透明的,卵室尚未形成),1级卵从寄生后第11天开始出现,2级卵从寄生后第12天开始出现,3级卵从羽化后第一天开始出现;喂20%蜂蜜水对卵巢发育有一定促进作用,能显著延长丽蝇蛹集金小蜂的寿命,不喂食或仅喂蒸馏水,其寿命仅4天,而喂食20%蜂蜜水,从第11天开始出现死亡,大部分可存活15天,另有少部分生存达一个月之久.同一种喂食处理中,卵巢长度的时间动态几乎都无变化;1级卵子数、2级卵子数和成熟卵子数的变化,是抛物线变化趋势,即先增加,然后减少;基部卵子短径和长径也是抛物线变化趋势.PAGE电泳结果表明:丽蝇蛹集金小蜂明显存在2条雌特异性带-卵黄蛋白,分子量分别为181 KD和136KD:SDS-PAGE电泳分析:存在3条雌特异性带,其分子量为123 KD、120 KD和91 KD,由此,可推定卵黄原蛋白(vitellogenin,Vg)和卵黄磷蛋白(vitellin,Vn)由2个蛋白组成,其中分子量较大的蛋白由2个亚基组成;双向电泳结果显示,在120KD附近有两个特异性点,其等电点为5.5和5.7;双扩散表明,丽蝇蛹集金小蜂卵黄磷蛋白的抗血清与雌隐成虫虫体、脂肪体、血淋巴和卵巢匀浆液均有免疫沉淀反应,而与雄蜂血淋巴无免疫反应,说明了Vg与Vn具有免疫同源性,是雌特异性蛋白,且由脂肪体合成.采用ELISA测定法检测了丽蝇蛹集金小蜂卵黄原蛋白合成与摄取,及卵黄磷蛋白降解的时间动态.结果表明,该蜂卵黄原蛋白的合成与摄取分别起始于寄生后的第10 d和第13d,即正处于该蜂的蛹初期和隐成虫期.该蜂卵内的卵黄磷蛋白随其胚胎发育过程而降解,寄生后第3d,即胚胎发育结束时则全部降解完毕.此外,尚探讨了卵黄蛋白合成、摄取和降解过程中,血淋巴、卵巢或卵内可溶性蛋白含量的时间动态变化.
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