不同频率电针对CCH模型大鼠rCBF的影响及机制探讨

来源 :浙江中医药大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:haiyutong
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
目的通过观察不同频率电针对慢性脑血流低灌注(chronic cerebral hypoperfusion,CCH)模型大鼠局部脑血流(regional cerebral blood flow,rCBF)和行为学的影响及脑内ROS、SOD、HIF-1α、ACh的表达,比较不同频率电针对CCH大鼠rCBF的影响并探讨电针改善CCH大鼠rCBF的机制。方法取健康SPF级雄性SD(Sprague Dawley)大鼠(3月龄)90只,随机分为假手术组(S组)、模型组(M组)、假电针组(SEA组)、2Hz电针组(2Hz组)、15Hz电针组(15Hz 组)、100Hz 电针组(100Hz 组)、2/15Hz 电针组(2/15Hz 组)、2/50Hz 电针组(2/50Hz组)、2/100Hz电针组(2/100Hz组),每组各10只。各组大鼠称重后在异氟烷吸入麻醉下行2-VO手术复制CCH模型(S组仅分离双侧颈总动脉,不予结扎处理),术后第二天进行电针治疗及平衡处理:各电针组取“百会”、“大椎”穴进行电针治疗,电针频率为各组对应频率,电流强度1mA,时间30min,SEA组输出电流为0mA,S组和M组进行平衡处理(抓取固定),每天一次。各组大鼠于造模后第21天开始进行行为学实验,第28天麻醉处死取材。观察指标:(1)各组于造模前、造模后30分钟、造模后2周及造模后4周(即处死前)检测大脑中动脉区域脑血流;(2)于术后第21天,使用Morris水迷宫、旷场和O迷宫实验检测大鼠在陌生环境下学习记忆能力和焦虑情绪;(3)采用酶联免疫吸附法(ELISA法)检测大鼠脑内ROS、SOD、HIF-1α、ACh的表达情况。结果(1)局部脑血流比较结果:术后30分钟手术组大鼠脑血流显著下降,差异具有统计学意义(P<0.01),随后脑血流逐渐增加,电针组大鼠脑血流增加较快。与M组相比,除1周100Hz组外,各电针组在各时相差异均有统计学意义(P<0.01);与SEA组比较,除100Hz组外,各电针组在各时相差异均有统计学意义(P<0.01);电针亚组之间比较,100Hz组脑血流增加较慢,从第1周开始,疏密波各组脑血流与100Hz组相比在各时相均有上升(P<0.05,P<0.01),15Hz组脑血流在第2周差异有统计学意义(P<0.05),2Hz组脑血流在第4周差异有统计学意义(P<0.01)。(2)行为学比较结果:1.水迷宫实验:水迷宫定位航行实验逃避潜伏期结果比较:随训练次数的增加,各组大鼠逃避潜伏期呈下降趋势,与S组相比,M组和100Hz组从第2天开始差异有统计学意义(P<0.05,P<0.01),SEA组和15Hz组在第4天和第5天差异有统计学意义(P<0.05,P<0.01);与M相比,SEA组逃避潜伏期从第4天开始明显降低(P<0.01),100Hz组在第5天明显降低(P<0.01),其它各电针组从第3天开始下降明显(P<0.05,P<0.01);与SEA组相比,2Hz组、2A5Hz组和2/l00Hz组在第4天逃避潜伏期差异有统计学意义(P<0.05,P<0.01);电针亚组之间比较,与同时相100Hz组比较,2Hz组、2/15Hz组、2/50Hz组和2/100Hz组从第4天开始差异有统计学意义(P<0.05,P<0.01)。水迷宫空间探索实验目标象限停留时间结果比较:与S组相比,M组、SEA组和100Hz电针组停留时间下降明显(P<0.01);与M组比较,SEA组和各电针组停留时间均增加(P<0.05,P<0.01);与SEA组相比,2Hz组和2/15Hz组、2/50Hz组停留时间较长(P<0.05);电针亚组之间比较:与100Hz组相比,2/15Hz组和2/50Hz组停留时间较长,差异具有统计学意义(P<0.05)。2.旷场实验各组中央区域停留时间比较:与S组相比,M组和SEA组停留时间较少,差异具有统计学意义(P<0.05);与M组和SEA组比较,各电针组停留时间均有延长,其中2Hz组、15Hz组、2/15Hz组和2/50Hz组差异具有统计学意义(P<0.05);电针亚组之间比较结果显示:与100Hz组相比,2Hz组和2/15Hz组差异具有统计学意义(P<0.05)。3.0迷宫各组开放臂停留时间比较:与S组相比,2/15Hz组停留时间较长,差异具有统计学意义(P<0.05);与M组和SEA组比较,各电针组停留时间均有延长,其中2Hz组、15Hz组和2/15Hz组停留时间较长,差异均有统计学意义(P<0.05,P<0.01);电针亚组之间比较结果显示:与100Hz组相比,2/15Hz组停留时间较长,差异具有统计学意义(P<0.05)。(3)ELISA检测结果:1.海马与额叶ROS表达情况:与S组相比,手术组ROS浓度显著升高(P<0.01);与M组相比,各电针组ROS浓度显著降低(P<0.01),SEA组额叶ROS浓度显著降低(P<0.01);与SEA组相比,各电针组ROS浓度显著降低(P<0.01);电针亚组之间比较结果显示:在海马中,与2Hz相比较,2/15Hz组和2/50Hz组ROS浓度显著升高(P<0.01),与15Hz组和100Hz组比较,疏密波电针组ROS浓度均显著降低(P<0.01);在额叶中,2/15Hz组ROS浓度较15Hz组和100Hz组均降低(P<0.05)。2.海马与额叶SOD表达情况:与S组相比,手术组SOD活性显著降低(P<0.01);与M组相比,各电针组SOD活性均升高(P<0.05,P<0.01);与SEA组相比,疏密波各组海马SOD活性显著升高,2/15Hz组、2/50Hz组额叶SOD活性显著升高(P<0.01),电针亚组之间比较结果显示:疏密波各组海马SOD活性与连续波各组相比均明显升高(P<0.01);2/15Hz组额叶SOD活性较2Hz组、100Hz组上升(P<0.05);2/50Hz组额叶SOD活性较100Hz组上升(P<0.05)。3.海马与额叶HIF-1α表达情况:与S组相比,手术组HIF-1α浓度显著上升(P<0.01);与M组、SEA组相比,电针各组HIF-1α浓度显著上升(P<0.01);电针亚组之间比较结果显示:在海马中,与100Hz组比较,其余各电针组HIF-1α浓度均显著升高(P<0.01),在额叶,15Hz组和疏密波各组HIF-1α浓度较100Hz组显著升高(P<0.01),2/15H组HIF-1α浓度较2Hz组显著升高(P<0.01)。4.海马与额叶ACh表达情况:与S组相比,手术组ACh浓度显著降低(P<0.01);与M组相比,除100Hz组海马ACh浓度外,各电针组ACh浓度均显著升高(P<0.01);与SEA组相比,海马中疏密波各组ACh浓度显著升高(P<0.01),额叶中电针各组ACh浓度均上升(P<0.05);电针亚组之间比较结果显示:连续波各组海马ACh浓度较100Hz组显著上升(P<0.01),2/50Hz组额叶ACh浓度较连续波各组均有升高(P<0.05)。结论(1)电针能提高CCH模型大鼠脑血流量并改善其认知能力:(2)连续波(2Hz,15Hz)及疏密波(2/15Hz,2/50Hz,2/100Hz)电针对CCH大鼠脑血流及认知能力的改善效果优于连续波(100Hz)电针,其中2/15Hz疏密波效果较好;(3)连续波(2Hz、15Hz)和疏密波(2/15Hz、2/50Hz)电针能缓解CCH大鼠的焦虑情绪,其中2/15Hz效果较好;(4)电针通过下调ROS的表达、增加SOD活性并促进HIF-1α、ACh的表达是改善CCH模型大鼠脑血流量的机制之一。
其他文献
目的 通过microRNA高通量测序法研究高尿酸血症(脾胃虚弱型)患者与正常对照者尿液外泌体源性microRNA表达谱的差异,以期发现具有良好应用前景的可用于诊断高尿酸血症的生物标志物,并进一步探讨microRNA对高尿酸血症的调控作用,为高尿酸血症发病机制的研究提供新的依据。方法 分别选取高尿酸血症(脾胃虚弱型)组和正常对照组各3例受试者,取中段尿用差速离心法收集尿液中的外泌体,再用TRIzol
学位
目的根据中医学“肺与大肠相表里”的理论依据,自拟“治肺方”、“治肠方”、“肺肠同治方”,观察不同方药治法对脓毒症肺损伤大鼠血清及肺组织中基质金属蛋白酶-9(Matrix metalloproteinase-9,MMP-9)、组织金属蛋白酶抑制物-1(Tissue inhibitor of metalloproteinases-1,TIMP-1)影响,计算MMP-9/TIMP-1比值,以及测定肺湿/
学位
目的基于国医大师夏桂成教授调周法之经后三期理论治疗月经后期,探究夏氏调周法的有效性及科学性,形成高效、安全、规范的诊疗方案。方法选取2016年1月至2017年2月在*****就医并符合月经后期标准的患者86例:分为试验组43例和对照组43例,试验组给予经后三期治法:初期滋阴养血,以阴扶阴,经后中期滋阴养血,佐以助阳,经后末期滋阴助阳,阴阳并调之法治疗;对照组给予经后期服用滋肾养血方。疗程3个月经周
学位
第一部分补体C4基因拷贝数变异及血清MBL、C4d水平与IgA肾病临床病理特征的相关性分析研究目的:探讨补体C4基因拷贝数变异及血清MBL、C4d水平与IgAN临床及病理特征的关系。方法:收集2015年—2016年在我科住院经肾活检确诊为原发性IgAN患者180例。采用TaqMan荧光定量PCR方法检测IgAN患者补体C4A和C4B基因拷贝数,酶联免疫吸附试验检测MBL、C4d水平,根据C4总基因
学位
目的探讨轻度蛋白尿IgAN患者(24小时尿蛋白定量<1g/d)的蛋白尿水平与中医证型、临床指标(例如镜下红细胞尿、肾功能)及肾活检病理之间的相关性,从而分析轻度IgAN临床及肾病理特点,探究影响轻度IgAN疾病进展的危险因素,以便及早发现及干预。方法回顾性收集2012年2月—2017年2月在我科住院经肾活检确诊为原发性IgAN患者409例。根据24小时尿蛋白定量将研究对象分组,探究轻度蛋白尿IgA
学位
目的探讨雷公藤甲素对局灶节段性肾小球硬化(Focal segmental glomerulosclerosis,FSGS)大鼠肾病理组织中尿激酶纤溶酶原激活物受体(urokinase plasminogen activator receptor,uPAR)、β3整合素(β3 integrin)表达的影响,及其与尿蛋白、肾功能水平及肾病理改变的相关性;为其在临床应用提供实验依据,同时为治疗FSGS开
学位
目的探索百会穴长留针对于学习记忆障碍大鼠的干预效应并通过BDNF及其受体trkB的表达探索百会穴长留针对学习记忆障碍大鼠影响的可能机制。方法采用新物体识别(Objectrecognition task,ORT)实验筛选出学习记忆能力正常且无疾病的清洁级3-6月龄SD雄性大鼠45只,体重为250-300g。实验大鼠由浙江省实验动物中心提供,温室下饲养并给予自由摄水。筛选后,按完全随机化原则分组,先分
学位
目的探讨康莱特注射液体外对晚期NSCLC患者及健康志愿者外周血来源诱导培养的自然杀伤细胞(natural killer cell,NK)的增殖、免疫表型及其对肺癌A549细胞杀伤活性的影响。方法分离晚期NSCLC患者(腺癌)及健康志愿者外周血单个核细胞(PBMC),第1天加入 rhIL-2(1000IU/ml)、抗 CD3 单抗(10ng/ml),置 37℃、5%C02培养箱中培养,每隔24小时补
学位
目的:脊髓损伤是一种非常严重的神经系统疾病,其损伤后胶质瘢痕的形成和神经的修复再生仍在研究中。间充质干细胞移植是治疗脊髓损伤的有效方法,但间充质干细胞移植后的存活和分化仍受很多因素的影响。补阳还五汤作为一种中医经典名方在脊髓损伤和脑卒中的治疗中取得的效果已得到肯定。Notch信号通路对神经干细胞的增殖和分化过程具有非常重要的意义,Nogo-A蛋白在脊髓损伤部位的表达影响着轴突再生和神经修复。本实验
学位
目的建立坐骨神经分支选择性损伤(SNI)诱导的神经病理痛模型,运用三磷酸腺苷受体小RNA(P2X3 siRNA)干预,观察其对SNI大鼠的足跖机械缩足阈(PWT)及术侧L4-6背根神经节(DRG)水平瞬时感受器电位受体1(TRPV1)的影响,探讨P2X3在SNI模型中的作用及其与TRPV1的关系。观察比较不同频率电针(EA)对SNI大鼠PWT的干预效应及DRG水平P2X3总蛋白、浆蛋白及阳性细胞表
学位