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扩张型心肌病(dilatedcardiomyopathy ，DCM)是以一侧或者双侧心室扩大为主要特征，常伴有进行性心肌收缩功能障碍的异质性心脏病。DCM是终末期心力衰竭的主要原因，心室重构是DCM的主要病理过程。DCM大鼠心肌组织中存在着心肌细胞的肥大、变性和坏死，这些病理性改变与交感神经过度增加有关。研究表明，自主神经系统(Autonomic nervous system，ANS)神经递质去甲肾上腺素(norepinephrine ，NE)与肾上腺素能受体结合，激活交感神经系统并诱导心肌细胞肥大与凋亡。抗纤益心方(Kangxian Yixin Decoction， KYD)是治疗DCM的临床经验方，对DCM气虚血瘀型的患者具有明显的治疗作用，前期研究证明，KYD能调节DCM大鼠的心功能，抑制心室重构，减少心肌组织中细胞凋亡，但机制尚不明确。因此，研究KYD对NE诱导的心肌细胞肥大及凋亡的影响，无论是对DCM发展过程中心室重构和心力衰竭的预防和治疗，还是对KYD进行系统、客观评价，都具有重要的理论和临床意义。
研究目的：利用H9c2大鼠心肌细胞模型，探究KYD对NE诱导的心肌细胞肥大及凋亡的影响。
研究方法：
1、H9c2大鼠心肌细胞培养。
2、KYD及NE的制备。
3、qPCR筛选NE诱导心肌细胞肥大及凋亡的最佳干预浓度及时间。
4、CCK-8检测KYD对心肌细胞活性的影响。
5、显微镜下观察KYD对NE诱导心肌细胞肥大的影响。
6、qPCR检测心肌细胞肥大相关指标ANP、BNPmRNA，凋亡相关因子Bcl-2、Bax、Caspase3mRNA的表达。
7、TUNEL染色用于观察心肌细胞凋亡的发生。
8、流式细胞术用于检测心肌细胞的凋亡率。
9、WesternBlot检测心肌细胞凋亡相关蛋白Bcl-2、Bax、Caspase3的表达。结果：
1、100μM的NE作用于H9c2心肌细胞24h为诱导心肌细胞肥大的最佳条件。
2、0.25mg/ml剂量的KYD无细胞毒性，且能有效拮抗心肌细胞肥大及凋亡的发生。
3、qPCR结果显示KYD可有效降低心肌细胞肥大指标ANP、BNPmRNA，且能下调凋亡指标Bax、Caspase3mRNA，上调Bcl-2mRNA。
4、TUNEL染色结果显示KYD可以抑制NE诱导的心肌细胞凋亡。
5、流式细胞仪检测心肌细胞凋亡率表明，KYD能显著降低NE诱导的心肌细胞的凋亡率。
6、WesternBlot检测结果显示，KYD可显著调节NE诱导的心肌细胞凋亡相关蛋白Bcl-2、Bax、Caspase3。
结论：
1、100μM的NE作用于H9c2心肌细胞24h可诱导心肌细胞肥大的发生；
2.0.25mg/mL剂量的KYD能拮抗NE诱导H9c2心肌细胞肥大和凋亡；
3.KYD通过调节ANP、BNP、Bcl2、Bax、与Caspase3表达，从而调节心肌细胞的肥大及肥大心肌细胞中的凋亡。
研究目的：利用H9c2大鼠心肌细胞模型，探究KYD对NE诱导的心肌细胞肥大及凋亡的影响。
研究方法：
1、H9c2大鼠心肌细胞培养。
2、KYD及NE的制备。
3、qPCR筛选NE诱导心肌细胞肥大及凋亡的最佳干预浓度及时间。
4、CCK-8检测KYD对心肌细胞活性的影响。
5、显微镜下观察KYD对NE诱导心肌细胞肥大的影响。
6、qPCR检测心肌细胞肥大相关指标ANP、BNPmRNA，凋亡相关因子Bcl-2、Bax、Caspase3mRNA的表达。
7、TUNEL染色用于观察心肌细胞凋亡的发生。
8、流式细胞术用于检测心肌细胞的凋亡率。
9、WesternBlot检测心肌细胞凋亡相关蛋白Bcl-2、Bax、Caspase3的表达。结果：
1、100μM的NE作用于H9c2心肌细胞24h为诱导心肌细胞肥大的最佳条件。
2、0.25mg/ml剂量的KYD无细胞毒性，且能有效拮抗心肌细胞肥大及凋亡的发生。
3、qPCR结果显示KYD可有效降低心肌细胞肥大指标ANP、BNPmRNA，且能下调凋亡指标Bax、Caspase3mRNA，上调Bcl-2mRNA。
4、TUNEL染色结果显示KYD可以抑制NE诱导的心肌细胞凋亡。
5、流式细胞仪检测心肌细胞凋亡率表明，KYD能显著降低NE诱导的心肌细胞的凋亡率。
6、WesternBlot检测结果显示，KYD可显著调节NE诱导的心肌细胞凋亡相关蛋白Bcl-2、Bax、Caspase3。
结论：
1、100μM的NE作用于H9c2心肌细胞24h可诱导心肌细胞肥大的发生；
2.0.25mg/mL剂量的KYD能拮抗NE诱导H9c2心肌细胞肥大和凋亡；
3.KYD通过调节ANP、BNP、Bcl2、Bax、与Caspase3表达，从而调节心肌细胞的肥大及肥大心肌细胞中的凋亡。