目的以体外培养的大鼠表皮细胞作为实验对象,使用大鼠烧伤血清模拟烧伤后表皮细胞的生长环境,检测加入外源性硫化氢后大鼠表皮细胞内H2S的含量和CSEm RNA的表达水平,明确大鼠表皮细胞是否存在H2S/CSE体系,探究外源性硫化氢和烧伤血清干预大鼠表皮细胞后表皮细胞内H2S/CSE体系的变化规律。方法将10只正常大鼠和42只烧伤18小时后的30%III°烧伤大鼠进行腹主动脉取血,离心后取血清备用。将体外培养的大鼠表皮细胞作为实验对象,提取原代同种乳鼠表皮细胞进行培养至第3代后,取培养的大鼠表皮细胞,随机分为三组(正常对照组、烧伤组、烧伤+Na HS组)铺于6孔板上,继续培养48小时后,用基础培养基对细胞进行同步化24小时,正常组用正常大鼠血清干预,烧伤组用烧伤大鼠血清干预,烧伤+Na HS组用烧伤大鼠血清及Na HS溶液干预,干预后在相同条件下培育1小时、6小时、12小时后收集细胞。用硫化氢检测试剂盒检出细胞内H2S含量;用离心柱法提取各组表皮细胞的总RNA,进行鉴定后用RT-q PCR测定各组表皮细胞的CSEm RNA基因表达水平。结果1.取烧伤大鼠烧伤处的皮肤进行病理切片,证明损伤程度达皮肤全层,为III°烧伤;2.比较大鼠表皮细胞内H2S含量:同一时间段,按不同干预方式分组进行比较,烧伤+Na HS组较正常组和烧伤组表皮细胞内H2S含量升高,P<0.05,结果有统计学意义;烧伤组较正常组表皮细胞内H2S含量有所下降,P<0.05,结果有统计学意义。同一种干预方式,按干预时间长短分组进行比较,各组之间大鼠表皮细胞内H2S的含量无显著性变化,P>0.05,结果无统计学意义;3.比较大鼠表皮细胞内CSEm RNA的表达水平:根据干预时间不同进行分组,正常对照组各时间点大鼠表皮细胞内CSEm RNA表达水平无明显差异,P>0.05,结果无统计学意义;烧伤组和烧伤+Na HS组各时间点大鼠表皮细胞内CSEm RNA表达水平有差异,P<0.05,结果有统计学意义。根据干预方式不同进行分组,各组大鼠表皮细胞内CSEm RNA表达水平有差异,P<0.05,结果有统计学意义。结论1.大鼠表皮细胞内存在H2S/CSE体系;2.烧伤应激会降低大鼠表皮细胞内H2S/CSE体系的效应;3.微量外源性硫化氢可以增强大鼠表皮细胞内H2S/CSE体系的效应。