牛黄形成机理的实验研究

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本研究对3头黄牛分别进行肝内左(右)胆管内插管术、胆总管阻断术、胆囊插管术、十二指肠插管术。三个插管分别引至体外。胆囊插管及十二指肠插管分别连接牛体外模拟胆囊(AG)固定架上的AG接头。进行牛体外AG内培植牛黄研究。术后定朋通过肝脏插管获得肝内胆管中的胆汁、通过胆囊引流管获得胆囊胆汁以及采集AG中胆汁;进行胆汁理化性状和主要成分分析、胆汁中细菌的计数以及通过对植黄牛肝脏病理组织学和超微结构的观察来探讨牛黄形成的机理和影响牛黄形成的因素。研究结果表明: 1.肝脏、胆囊和AG中胆汁的胆红素含量在术后明显的升高(P<0.01),而后下降到一个平衡状态。在三个部位的胆汁中,其中肝内胆管中胆汁胆红素的含量最高,AG中胆汁胆红素含量最低,两者差异极显著(P<0.01);胆汁胆酸含量术后下降,其中胆囊胆汁中胆酸含量最高,AG中胆汁胆酸含量为最低,两者差异不显著(P>0.05):胆汁粘蛋白的含量升高,其中胆囊胆汁粘蛋白含量最高,AG胆汁粘蛋白含量最低,两者差异极显著(P<0.01);胆汁pH值术后降低,其中AG胆汁的pH值下降极显著(P<0.01),最低达到pH=6.5;胆汁中钙离子和镁离子含量也呈下降趋势,但与术前比较差异不显著(P>0.05):肝脏、胆囊和AG三个不同部位的胆汁钙、镁离子含量差异不显著(P>0.05)。 2.植黄前肝内胆管内胆汁和胆囊内胆汁均未检出细菌;在术后第七天向AG中接种非致病性耐胆汁的大肠杆菌后,三个部位胆汁中大肠杆菌的数量明显增多;肝内胆管中胆汁、胆囊中胆汁和AG内胆汁的大肠杆菌含量分别是106、107-8、109个/ml;经分析,胆汁中大肠杆菌的含量与胆汁胆红素、胆酸的含量有密切关系。 3.对植黄牛肝脏病理组织学检查发现:肝细胞结构基本正常,胆管高度增生,胆管扩张明显;在胆管周围有明显的炎性细胞浸润;胆管内有均质红染的物质;植黄牛肝胆小管内有胆红素沉着。从组织学变化证明了牛黄形成部位是起源于肝内胆管。 肝脏的电镜超微结构观察:肝组织基本正常,微胆管扩张,微绒毛肿胀粗大;滑膜内质网增多,滑膜内质网池变宽,有的滑膜内质网呈泡状;两肝细胞间隙增大;肝细胞间有纤维素增生;间质中有淋巴细胞浸润。肝细胞的这些变化,有利于胆红素含量的升高。 牛黄的形成过程是在肝胆组织分泌机能增强以及胆汁在耐胆汁的非致病性大肠杆菌的作用下,胆汁的理化性状和主要成分的含量发生了变化,正常胆汁变为成黄性胆汁。胆汁中游离胆红素增多,与钙离子等金属离子结合,在粘多糖的作用下,形成胆素钙粘多糖高分子多聚物复合体,即牛黄小颗粒。
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