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目的:统计、观察鼻咽癌5-8F细胞株与LEC细胞株交互作用后形态学变化,为进一步探讨鼻咽癌的淋巴转移机制奠定基础。方法:以红色荧光标记、绿色荧光标记的慢病毒为转染载体,选定不同的MOI值转染鼻咽癌5-8F细胞株、淋巴管内皮细胞(LEC),扩大培养后筛选纯化,流式细胞仪检测转染效率。取最佳MOI值转染后的5-8F(RFP-5-8F)与未转染的亲代5-8F为比较,进行MTT、划痕实验,观察细胞镜下形态,了解细胞转染前后生长曲线,细胞迁移能力的变化,以确定荧光标记的慢病毒转染对细胞株的生物学行为是否存在影响。取对数生长期的RFP-5-8F、GFP-LEC细胞适宜细胞密度共培养,活细胞工作站动态观察其生长迁移情况。取对数生长期的RFP-5-8F、GFP-LEC细胞,采用易必迪伤口愈合实验专用插件行划痕实验,观察共培养下细胞的迁移修复能力。取单独培养RFP-5-8F细胞,共培养的RFP-5-8F+GFP-LEC细胞接种于BALB/c裸鼠腋下,观察裸鼠皮下成瘤,用活体荧光成像协助观察裸鼠肿瘤淋巴结转移情况。在铺BD Matrigel基质胶于培养皿底部情况下,取单独的GFP-LEC细胞与RFP-5-8F+GFP-LEC共培养后观察淋巴管内皮细胞的小管形成能力。应用SPSS16.0统计学分析软件分析数据,P<0.05表示有统计学意义。结果:流式细胞仪检测5-8F细胞慢病毒转染效率大于95%,转染最佳MOI值为30,镜下荧光强度适中。转染前后5-8F细胞光镜形态相似,生长曲线一致,差异无统计学意义(P=0.997),划痕实验显示5-8F与RFP-5-8F细胞迁移能力一致,差异无统计学意义(P>0.05)。活细胞工作站观察共培养的RFP-5-8F、GFP-LEC细胞促使GFP-LEC围绕肿瘤细胞(RFP-5-8F)行成类似管腔样结构。与RFP-5-8F共培养GFP-LEC细胞迁移能力大于单独培养的GFP-LEC细胞,差异有统计学意义(P<0.05)。与RFP-5-8F共培养的GFP-LEC的小管形成能力与单独培养的小管形成能力无明显差别,差异无统计学意义(P>0.05)。RFP-5-8F与GFP-LEC细胞共培养后裸鼠局部成瘤生长较单独RFP-5-8F的减缓,但淋巴结转移出现更早、更明显。结论:慢病毒转染红色荧光蛋白对5-8F细胞的生物学特性无显著影响,RFP-5-8F可代表5-8F用于后继实验。RFP-5-8F、GFP-LEC细胞共培养后,促进GFP-LEC向RFP-5-8F迁移的能力增强并形成类似管腔样结构;增强肿瘤细胞RFP-5-8F迁移能力;鼻咽癌细胞与淋巴管内皮细胞接触并发生交互作用有可能是鼻咽癌淋巴结转移的重要原因,其机制通路有待于进一步研究。