壳聚糖硬膜补片及羟丁基壳聚糖修复硬脑膜的实验研究

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硬脑(脊)膜为保护脑组织及脊髓的一道重要屏障,其完整性对于保护脑及脊髓结构及功能意义重大。硬脑(脊)膜可因外伤、肿瘤、减压手术等多种原因造成损伤,并可引起出血、脑脊液漏、感染、疤痕粘连等各种严重后果。因此手术修补硬脑(脊)膜是非常必要及重要的。本实验应用新型复合壳聚糖硬膜补片和温敏性羟丁基壳聚糖材料进行家兔硬脑膜修补术,旨在考察其作为硬脑(脊)膜修补材料的安全性及有效性。壳聚糖补片及羟丁基壳聚糖修复硬脑膜的实验研究[目的]:探讨一种壳聚糖硬膜补片及温敏性羟丁基壳聚糖材料用于修补硬脑膜缺损的安全性及有效性。[方法]:36只新西兰兔随机分A、B两组,每组18只。其中A组又分为实验组1(壳聚糖硬膜补片材料组)和对照组1(来源于牛心包组织的生物脑膜补片),B组为实验组2(温敏性羟丁基壳聚糖材料组)和对照组2(硬膜缺损空白对照组)。术前A组和B组各随机选出6只兔子抽取1 ml静脉血样留置于EDTA抗凝管作为第1次血常规。动物剃毛后兔耳缘静脉近端留置静脉留置针。动物10%水合氯醛2ml/kg经静脉缓慢注射麻醉。取兔颅骨中线直切口5cm,暴露颅骨冠状缝及矢状缝。于冠状缝后侧、矢状缝两侧形成12m×12mm骨窗,暴露硬脑膜。用显微剪于两侧剪除8mm×8mm矩形硬脑膜。按上述分组分别将复合壳聚糖补片、羟丁基壳聚糖、生物硬膜补片覆盖于硬脑膜缺损处构建硬脑膜缺损修复动物模型。A、B每组动物分别于术后30、60、90 d各处死6只,并对第一取血兔子术后3d、术后30d及术后60d采集静脉血行白细胞、淋巴细胞计数。处死后于修补材料部位取材行HE组织学检查、Masson’s胶原纤维观察及CD34免疫组化观察。[结果]:A组术后3d、30d、60d白细胞、淋巴细胞计数与术前相比无明显统计学差异(P>0.05)。B组术后3d、30d、60d白细胞、淋巴细胞计数与术前相比无明显统计学差异(P>0.05)。说明复合壳聚糖硬膜补片及羟丁基壳聚糖均未引起机体的免疫排斥反应。病理结果提示:实验组1、2硬膜缺损处有新的胶原纤维层形成,局部无粘连,无明显炎性细胞浸润,随着时间推移胶原纤维层逐渐成熟。对照组1局部无明显粘连,无炎性细胞浸润,材料逐渐降解,毛细血管长入,但未形成新的胶原纤维层。空白对照组脑组织粘连严重,并呈过度纤维化。Masson’s结果表明在实验组1、2和对照组2胶原纤维随时间推移不断增加,排列由疏松变得致密。对照组2的胶原纤维组织要多于实验组1、2。实验组1、2及对照组1 CD34阳性表达逐渐增高,对照组2结果与实验组1、2之间有统计学差异(P<0.01)。说明复合壳聚糖硬膜补片及羟丁基壳聚糖均可抑制成纤维细胞增生及疤痕形成。[结论]:壳聚糖硬膜补片及温敏性羟丁基壳聚糖材料是安全、有效的硬膜修补材料,能够在硬脑膜缺损部位形成新的胶原纤维层。
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