目的从细胞层面研究蒙药当贡-3是否通过干预mi RNA-126表达从而对心肌缺血-再灌注损伤具有保护作用,为临床医师常规治疗冠心病缺血再灌注损伤提供一种新的药物选择和理论依据。方法1.建立体外H9C2细胞缺氧/复氧(H/R)损伤模型模拟心肌缺血/再灌注(MI/RI)损伤。H9C2细胞缺氧低糖孵育3h,然后复氧复糖孵育6h,以此作为缺氧/复氧损伤条件。2.确定蒙药当贡-3的安全性和最佳剂量。五种剂量药物0.8、0.4、0.2、0.1、0.05mg/ml分别作用于H9C2细胞,MTT法检测细胞存活率,确定0.2、0.1、0.05mg/ml的药物,分别代表高剂量、中剂量、低剂量用于后续实验。3.细胞分组:(1)空白对照组;(2)H/R组;(3)H/R+当贡-3高剂量组;(4)H/R+当贡-3中剂量组;(5)H/R+当贡-3低剂量组。4.ELISA法检测细胞培养液内的天冬氨酸转氨酶(AST)的释放、细胞内超氧化物歧化酶(SOD)及谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)的活性。5.实时荧光定量-PCR(q-PCR)检测各组细胞mi RNA-126的表达水平。结果1.不同浓度剂量的当贡-3,0.8、0.4mg/ml均造成H9C2细胞损伤,选择0.2、0.1、0.05mg/ml的药物用于后续实验。2.缺氧/复氧(H/R)后,H9C2细胞存活率下降为45.79%,低于对照组,P<0.05。药物预处理后,高、中、低三种剂量均可提高细胞存活率,分别为88.55%、80.80%、74.09%,P<0.05,随着剂量的降低作用减弱。3.H/R后,H9C2细胞SOD活性明显下降为12.40U/mg.prot,低于对照组的21.71U/mg.prot,P<0.05,而高、中、低三种剂量的药物预处理均可增加SOD的活性,分别为19.66、17.17、15.14U/mg.prot,高于模型组,P<0.05。4.H/R后,H9C2细胞AST释放增加达68.32U/ml,高于空白对照组的34.78U/ml,P<0.05,高、中、低三种剂量的当贡-3预处理均可降低AST,分别为50.33、56.18、60.37U/ml,P<0.05。5.H/R后,H9C2细胞GSH-Px活性降低,为71.58μmol/L,低于空白对照组的118.51μmol/L,P<0.05;高、中、低三种剂量的当贡-3预处理均可增加GSH-Px活性,分别为104.13、93.06、80.30μmol/L,P<0.05。6.H9C2细胞在H/R后,mi RNA-126表达降低,为0.42,低于空白对照组,P<0.05,高、中、低三种剂量的当贡-3预处理均可增加mi RNA-126表达,分别为0.81、0.72、0.60,均较模型组升高,P<0.05,高剂量组作用明显。结论当贡-3预处理对由缺氧/复氧损伤的H9C2细胞具有保护作用,能够降低AST,增加SOD和GSH-Px的活性来增强细胞的抗氧化能力,其保护机制可能与调节miRNA-126表达有关。