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建兰花叶病毒（Cymbidium mosaic virus，CymMV）和齿兰环斑病毒（Odontoglossum ringspot virus，ORSV）是侵染兰花最常见的两种病毒。它们使兰花叶片形成褪绿条纹、凹陷的灰白斑或坏死圈斑等症状，导致植株生长不良、开花小而少，花期缩短，给花卉生产造成严重损失。CymMV隶属线形病毒科（Flexiviridae）、马铃薯X病毒属（Potexvirus），病毒RNA基因组全序列约6-7 kb，与该同属的其它成员有很高的同源性。整个基因组由5个开放读码框架（ORF）构成，其中CP基因是完整地ORF5框，长约700nt，编码24kD的外壳蛋白。ORSV隶属烟草花叶病毒属（Tobamovirus），病毒RNA基因组全序列约5-6 kb，含有4个ORF，CP基因是完整的ORF4，长约600nt，编码17kD的外壳蛋白。 通过负染和超薄切片观察到蝴蝶兰（P. amabilis）病叶中线状和杆状病毒颗粒。进一步的组织切片观察，同时发现两种病毒的典型聚集体：CymMV呈带状聚集体，粒子多层排列，层间成一定角度或螺旋相叠；ORSV聚集体呈平行、角层状或螺旋型排列。二种病毒聚集体均出现于薄壁细胞、细胞间隙和维管束中，感病细胞中叶绿体发育不全；线粒体增生、肿胀甚至空化；细胞核膨大、空化。通过建立多重 RT-PCR体系，同时扩增到建兰花叶病毒（CymMV）和齿兰环斑病毒（ORSV）的外壳蛋白基因。经序列测定和同源性比对，与GenBank已知分离物同源性分别达到98％和99-100%。从细胞和分子层面共同揭示了CymMV与ORSV复合侵染兰科植物后细胞超微结构病变特征。同时为两种病毒的复合侵染提供快速直接的鉴定依据。 用RT-PCR方法获得了CymMV和ORSV外壳蛋白基因，将两个基因片段分别插入原核表达载体 pET32c，构建载体 pET32c-CymMV-CP和pET32c-ORSV-CP并转化大肠杆菌BL21，经IPTG诱导后获得了重组蛋白表达，Western blotting分析证实表达产物具有免疫反应性。根据Western blot结果，将含两种重组质粒的重组菌大量表达，并通过镍琼脂糖凝胶纯化蛋白，免疫家兔，制备了CymMV和ORSV的多克隆抗体，并通过ELISA测定了抗体效价。 总之，本研究从细胞层面、分子层面及免疫学层面对CymMV和ORSV进行了初步研究。探讨了感染这两种病毒的植物组织超微结构病变，建立了多重RT-PCR鉴定体系，为这两种病毒的快速鉴定提供依据。原核表达了病毒外壳蛋白并制备了多克隆抗体，为CymMV和ORSV病毒诊断试剂盒的开发奠定了基础。