论文部分内容阅读
[目的]： 1.探讨let-7a和HMGA2在鼻咽癌及正常鼻咽粘膜组织样品的表达情况，以及它们表达与鼻咽癌患者临床特征的联系。 2、研究let-7a和HMGA2对鼻咽癌细胞的迁移及侵袭功能影响。 3、探讨let-7a和HMGA2影响鼻咽癌细胞迁移及侵袭可能的分子机制。 [方法]： 通过qRT-PCR检测48例鼻咽癌及鼻咽上皮组织let-7a和HMGA2的表达。在miRNA靶基因数据库预测let-7a调控HMGA2的3-UTR位点，双荧光素酶报告系统检测let-7a对靶基因HMGA2的直接调控作用，通过qRT-PCR和Western Blot检测let-7a与HMGA2的mRNA和蛋白水平的影响。Transwell迁移和侵袭实验检测let-7a和HMGA2对鼻咽癌细胞迁移和侵袭能力的影响。通过Western Blot检测let-7a和HMGA2在鼻咽癌细胞中对侵袭相关蛋白的影响。 [结果]： 1.Let-7a在鼻咽癌组织中低表达(P＜0.001)，并且其低表达与鼻咽癌患者的临床分期(P=0.014)，T分期(P=0.009)，N分期相关(P=0.039)。 2.HMGA2在鼻咽癌组织中高表达(P＜0.001)，并且其高表达与鼻咽癌患者的临床分期(P=0.024)，N分期相关(P=0.002)。 3.在48鼻咽癌患者组织样本中，let-7a与HMGA2的表达呈负相关(r=-0.385，P=0.007)。 4.通过miRNA数据库预测HMGA2的3UTR区域存在let-7a的结合位点，并且通过双荧光素酶报告系统证实let-7a直接与HMGA2的3UTR区域结合，通过qRT-PCR和Western Blot发现，let-7a负性调控HMGA2的蛋白质表达，对其mRNA无影响。此外，HMGA2不能反向调节let-7a的表达。 5.在鼻咽癌细胞中，通过let-7amimics上调let-7a的表达能明显抑制鼻咽癌细胞株的迁移和侵袭能力。 6.在鼻咽癌细胞中，通过si-RNA下调HMGA2的表达能够明显抑制鼻咽癌细胞株的迁移和侵袭能力。 7.Let7a和HMGA2能影响上皮间质转化相关基因的表达。 [结论]： 1.Let-7a和HMGA2在鼻咽癌组织中表达异常，并且与鼻咽癌患者临床特征相关。 2.Let-7a靶向负性转录后水平调控HMGA2抑制鼻咽癌细胞迁移、侵袭及上皮间质转化过程。