第一部分妥泰在血清及脑脊液中药物浓度测定的方法学研究目的建立测定血清及脑脊液（CSF ）中妥泰(TPM)浓度的气相色谱－质谱法(GC-MS)新的检测手段，为进行TPM 的药代动力学研究和临床药物浓度监测奠定基础。方法采用乙酸乙酯进行样品的提取，盐酸阿米替林作为内标，氦气为载体，流速为1.0ml/min ，柱前压为91.5kPa 。 升温程序：柱温150 ℃恒温2min ，以20 ℃·min -1 的速率升温至280 ℃。 以电子轰击离子源（EI ）,选择性离子监测（SIM ）模式分别选择M/Z为324 和202 的碎片离子对TPM 和阿米替林进行检测。结果血清及CSF 中无干扰测定TPM 的内源性物质，每个样品的分析时间≤11min ，本法在血清中TPM 的最低定量检测浓度为0.180 μg · ml－1 。在CSF 中TPM 的最低定量检测浓度为0.036 μg ·ml－1 。血清样品检测的日内RSD≤8.53％，日间RSD ≤14.19％。CSF 样品检测的日内RSD ≤7.70％，日间RSD ≤10.57％。血清中三种不同浓度(低、中、高)TPM 的平均回收率为(101.4 ±7.20)％(n=15) ，萃取回收率为64.09％，萃取相对回收率为80.26％。CSF 中三种不同浓度(低、中、高)TPM 的平均回收率为（102.55 ±6.88)％(n=15)，萃取回收率为79.80 ％，萃取相对回收率为86.15％。结论本实验成功的建立了在血清及CSF 中TPM 药物浓度检测的GC-MS 法，此方法操作简便、快速、准确、灵敏度高、重复性好，适用于临床药物动力学研究和常规的TPM 临床药物浓度监测。 第二部分TPM 与VPA 单剂联合单次口服在血清及CSF 中药-动学特征及相互作用目的研究TPM 、VPA 分别中剂量单剂单次口服后在血清及CSF 中的药代动力学特征以及两药联合单次口服后在血清及CSF 中的药物相互作用及意义。 方法: （1 ）将12 只beagle 犬随机分成A 、B 、C 三组，每组4 只，雌雄各半； （2 ）A 、B 、C 三组按照实验设计要求分别：A组给予TPM 单药单次口服；B 组给予VPA 单药单次口服；C 组两药单剂联合单次口服；上述各组在给药后按照预实验结果在各时间点采集血及CSF 样本，经预处理后置入－20 ℃低温冰箱保存待检； （3 ）荧光偏振免疫分析法（FPIA ）测定VPA 在血清及CSF 中药物浓度，GC-MS法测定TPM 在血清及CSF 中药物浓度； （4 ）用DAS2.0 版程序计算药代动力学参数，并应用SPSS13.0 软件进行统计学处理。实验结果以“均数±标准差”（x ±s ）表示，P ＜0.05 有统计学差异。 结论: （1 ）实验结果表明中剂量TPM+VPA 联合单次给药后VPA 有促使血清中TPM的吸收增加、峰浓度增高，消除加快，达峰时间提前的趋势，但无统计学差异。提示在非稳态的联合中剂量单次给药后VPA 可加快TPM 的吸收速率，促进TPM 的代谢；而在此种情况下，在CSF 中的代谢则与此相反，说明TPM 在非稳态情况下在血清和CSF 中的代谢机制可能存在差异； （2 ）中剂量TPM+VPA 联合单次给药后TPM 可使VPA 在血清中的峰浓度降低，清除率增加，达峰时间提前，且具有统计学上的显著性差异。提示在非稳态的联合中剂量单次给药后TPM 可促进VPA 的代谢，使清除率增加，达峰时间提前； （3 ）TPM+VPA 联合在中剂量给药非稳态情况下在血清中可相互促进其代谢，而在脑内的代谢可能存在相互抑制使在CSF 中TPM 和VPA 的滞留时间延长，药物浓度增加。 第三部分TPM 与VPA 单药口服达稳态时交叉添加后的药物相互作用及意义目的研究TPM 与VPA 分别单药口服达稳态时交叉添加另一药物后的相互作用及意义。 方法: （1 ）将8 只beagle 犬随机分成E 、F 两组，每组4 只，雌雄各半； （2 ）E 、F 二组按照实验设计要求分别：E 组给予TPM 单药连续口服达稳态后添加单剂量VPA ；F 组给予VPA 单药连续口服达稳态后添加单剂量TPM 。上述各组在添加单剂给药后按照预实验结果在各时间点采集血及CSF 样本，经预处理后置入－20 ℃低温冰箱保存待检； （3 ）FPIA 法测定VPA 在血清及CSF 中药物浓度，GC-MS法测定TPM 在血清及CSF 中药物浓度；（4 ）用DAS2.0 版程序计算药代动力学参数，并应用SPSS13.0 软件进行统计学处理。实验结果以“均数±标准差”（x ±s ）表示，P ＜0.05 有统计学差异。 结论: （1 ）当VPA 连续口服给药达稳态时添加单剂量TPM 后有促使TPM 在血清中代谢加快的趋势，但无统计学上差异；而在CSF 中可使TPM 的清除减慢，峰浓度增加，且具有统计学意义，提示VPA 达稳态时添加单剂TPM 后可能加快TPM 在血清中的代谢和清除，而在CSF 中可使其清除下降，浓度增高，使其在作用部位的TPM 浓度增加； （2 ）当VPA 连续口服达稳态时添加单剂量TPM 后对TPM 在血清和CSF 中的药-动学参数的影响是非一致性的，说明TPM 本身在脑内和血清中的代谢机制可能并不一致，而VPA 对这一特征有促进作用。 （3 ）当TPM 连续口服给药达稳态时添加单剂量VPA 可促使在血清和CSF 中VPA 的代谢和清除加快，使VPA 在血清和CSF 中的药物峰浓度降低，提示在此种情况下TPM 可加快VPA 在血清及CSF 中的代谢，降低其药物浓度，可能在临床上具有当两药联合应用时需对剂量进行调整的指导意义。 第四部分TPM 与VPA 联合给药达稳态后在血清及CSF 中药物相互作用及意义目的研究TPM 与VPA 联合给药达稳态后在血清及CSF 中药物相互作用及意义。 方法: （1 ）将12 只beagle 犬随机分成a 、b 、c 三组，每组4 只，雌雄各半； （2 ）a 、b 、c 三组按照实验设计要求分别：a 组给予TPM 单药连续口服达稳态；b 组给予VPA 单药连续口服达稳态；c 组两药联合应用连续口服达稳态。上述各组在给药后按照预实验结果在各时间点采集血及CSF 样本，经预处理后置入－20 ℃低温冰箱保存待检； （3 ）FPIA 法测定VPA 在血清及CSF 中药物浓度，GC-MS 法测定TPM 在血清及CSF 中药物浓度； （4 ）应用SPSS13.0 软件做统计学处理并用百分数进行描述性分析。实验结果以“均数±标准差”（x±s ）表示。 结果: （1 ）单药中剂量连续口服TPM 达稳态后与TPM+VPA中剂量连续口服达稳态后峰、谷药物浓度比较，TPM 在血清中峰、谷浓度增加分别为121.4 ％和32.0 ％，在CSF 中峰浓度增加98.6 ％，谷浓度无显著变化； （2 ）单药中剂量连续口服VPA 达稳态后与VPA+TPM中剂量连续口服达稳态后峰、谷药物浓度比较，VPA 在血清中峰、谷浓度分别降低19.0 ％和97.5％，在CSF 中峰、谷浓度分别降低23.1％和77.1 ％。 结论: （1 ）两药联合应用达稳态后，VPA 可使TPM 在血清中峰、谷浓度及CSF 中峰浓度均增高，提示在两药联合应用达稳态后，VPA 可明显降低TPM 的代谢，增高其在血清中的峰、谷浓度，其中峰浓度增加达121.4 ％,可能具有一定的临床意义； （2 ）两药联合应用达稳态后，TPM 可使VPA 在血清及CSF 中谷浓度显著降低，在血清中的谷浓度下降更为明显达97.5 ％。表明两药联合应用达稳态后TPM 可显著加速VPA 的代谢和清除，使其在血清及CSF 的峰、谷浓度显著降低； （3 ）实验结果提示TPM 与VPA 在联合应用达稳态时可能存在某种复杂的抑制和/或竞争性代谢机制，VPA 可显著抑制TPM 在血清及CSF 中的代谢，使其药物浓度增高，而TPM 则可促进VPA 的代谢使其在血清及CSF 中的代谢和清除加快，药物浓度降低，在临床可能具有药物剂量调整的指导价值； （4 ）本实验表明尽管TPM 单药应用时在低、中、高剂量情况下均呈线性药动学，而与传统的AEDs VPA 联合应用时，则可能改变这一趋势，使其在相同剂量下在血清和CSF 中的峰、谷浓度均显著增加，VPA 浓度显著下降。 因此，当TPM 与VPA联合应用时适时监测其血药浓度以尽量减少TPM 高浓度带来的不良反应和VPA 浓度下降引起发作可能增加是有益的。