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本文进行了以少根紫萍(Landoltia punctata)为原料,以丙酮丁醇梭菌(Clostridium acetobutylicum CICC8012)为菌种发酵生产燃料丁醇的研究。首先对少根紫萍的淀粉和单糖组成进行了分析,并进行了以少根紫萍为原料的燃料丁醇发酵,经初步发酵和降粘工艺处理后发酵表明糊化后的少根紫萍培养基可以顺利发酵,并且还具有目标产物丁醇比例高的优点,最后对发酵醪进行了残糖分析。全文共分为三部分:
第一部分:少根紫萍的淀粉及单糖分析。首先在显微镜下观察了碘染色后的少根紫萍鲜萍的淀粉颗粒,并从野外采集的浮萍样品中筛选出高淀粉含量的少根紫萍(L.punctata),HPLC法分析了其酸水解液和酶水解液的单糖组成。分析表明少根紫萍的酸水解液单糖组成有葡萄糖,木糖和半乳糖,其比例为28:1:4,含量分别为32.24%,1.15%,4.61%;液化糖化处理后的酶水解液的单糖组成只有葡萄糖,含量为28.23%。
第二部分:少根紫萍(L.punctata)燃料丁醇初步发酵及降粘后发酵。首先进行了少根紫萍燃料丁醇的初步发酵,糊化后的少根紫萍培养基可以直接发酵,47.50 g/L的初总糖发酵可生成9.31 g/L的丁醇、13.60 g/L的总溶剂,发酵得率为0.35,其中丁醇占总溶剂的比例为68.46%,比玉米发酵的高出14.11%。针对糊化后的少根紫萍培养基粘度过大的问题,又进行了少根紫萍培养基降粘工艺的开发。比较了木聚糖酶,果胶酶和纤维素酶三种酶的降粘效果,结果表明纤维素酶对糊化后的少根紫萍培养基的降粘效果最好,木聚糖酶次之,果胶酶降粘效果不明显。少根紫萍培养基经降粘后发酵,丁醇和总溶剂分别提高到9.61 g/L和14.80 g/L,比没降粘的分别提高了3.22%和8.82%。
第三部分:少根紫萍(L.punctata)燃料丁醇发酵后的残糖分析。HPLC分析表明少根紫萍燃料丁醇发酵结束的发酵残糖含有寡聚糖和少量的葡萄糖,其中寡聚糖含有木糖和半乳糖。残总糖在0.8%以下,残葡萄糖在0.5%以下,表明以少根紫萍(L.punctata)为原料的燃料丁醇发酵糖的利用比较彻底。
本研究首次开发了一种新型非粮原料少根紫萍(L.punctata)发酵生产燃料丁醇,工艺简单,并且还具有目标产物丁醇在总溶剂的比例高的优点。